Экспресс-тест на сифилис: достоинства диагностики, показания, как подготовиться и показания к проведению. Как выявить сифилис на обследовании, методами лабораторной и экспресс диагностики Методы диагностики сифилиса

Российский национально исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова

Кафедра дерматовенерологии педиатрического факультета

Доклад на тему: Лабораторные методы диагностики сифилиса

Выполнил: Студент 440 в группы

Педиатрического факультета

Серанов Игорь Анатольевич

Нетрепонемные исследования

Трепонемные исследования

Комплекс проведения серологических реакций

Реакция Вассермана

Реакция иммунофлюоресценции

Реакция имунного прилипания

Реакция иммобилизации бледных трепонем

Реакция иммунофлюоресценцией адсорбцией бледных трепонем

Реакция гемагглютинационная

Иммуноферментный анализ

Полимеразная цепная реакция

Все серологические методы исследования, которые применяются на сегодня, условно разделяются на два вида: нетрепонемные , отборочные (НТТ)- и трепонемные , которые подтверждают наличие возбудителя (ТТ).Сифилис протекает очень сложно, клиника очень смазана и не всегда проявляется, поэтому для постановления правильного диагноза используют сразу несколько серологических тестов. При визуалированном подтверждении присутствия во взятом материале бледной трепонемы (при помощи микроскопа) диагноз ставится сразу же, и остальные тесты проводятся редко.

Нетрепонемные исследования (тесты) - НТТ - это так называемые отборочные исследования, они не очень дорого стоят и при их помощи можно обследовать достаточно большое число пациентов, к тому же результаты при многих тестах готовы очень быстро. Но при ложном течении заболевания, при низкой чувствительности проведение таких тестов нецелесообразно, 100%-ный результат получить не удастся.

При проведении нетрепонемных тестов в материале, который исследуется, обнаруживаются антитела, которые реагируют с кардиолипин - лецитиновым антигеном . Одним из первых тестов был метод, основанный на иммунологической реакции Борде - Жангу, где в качестве антигена выступал экстракт печени новорожденного ребёнка, который умер от сифилиса. На сегодня при проведении таких тестов антигеном выступают лецитин, холестерин и кардиолипин .

За границей, в частности в США используют 4 нетрепонемных метода, которые делятся на два вида: методы, которые позволяют визуально определить результаты реакции (RPR и TRUST) и методы микроскопического считывания результатов(USR и VDRL).

К нетрепонемным методам диагностики относится непрямой иммуноферментный анализ с использованием кардиолипина в качестве антигена. У нас в стране и в странах СНГ в качестве нетрепонемных тестов выступают реакция плазмы с инактивированной сывороткой (МР) и реакция, при которой происходит связывание комплимента с кардиолипином (РСК) .

Все методы нетрепонемной диагностики очень похожи друг с другом. У них у всех невысокая стоимость, их просто и быстро провести. Эти виды тестов не подходят при выявлении заболевания на первичной стадии и при сифилисе, который протекает скрытно (латентная форма сифилиса). Антитела, которые определяются нетрепонемным тестом появляются, где то через месяц после инфицирования трепонемой. В большинстве случаев у больных, которые лечили первичную стадию сифилиса, примерно около года нетрепонемные тесты имеют отрицательный результат.

Трепонемные исследования (тесты) - ТТ стоят намного дороже, техника проведения их очень сложная и они используются для подтверждения положительных результатов, которые были получены при нетрепонемных исследованиях.

Как мы говорили выше трепонемные методы применяют для того, чтобы подтвердить наличие бледной трепонемы в организме, которое было выявлено при помощи нетрепонемных тестов. Так же их проводят, если проводимые анализы так и не дали положительного результата, но клиника предполагает наличие заболевания. После полного излечения сифилиса более чем у 80% вылечившихся наблюдается положительная реакция при проведении трепонемных тестов ещё несколько лет, а у некоторых - всю жизнь. Исходя из этого трепонемные тесты не используют для профилактических осмотров у людей, которые прошли полный курс лечения.

Научные исследования в области иммунологии и молекулярной биологии продолжаются постоянно и при помощи новейших технологий появляются всё новые тесты для диагностики сифилиса, которые прочно занимают лидирующие позиции. Один из таких тестов, который прочно вошёл в практику - иммуноферментный анализ (ИФА) , а многие исследовательские методы находятся на стадиях разработки.

Тот комплекс проведения серологических исследований , который проводят в России включает в себя комплексное проведение серологических реакций:

стандартных серологических реакций –

реакцию связывания комплемента(реакция Вассермана),

реакцию с трепонемным антигеном и реакцию с кардиолипином;

груповых трепонемных реакций-

реакцию иммунофлюоресценции (РИФ)

реакцию иммунного прилипания(РИП);

видоспецифических протеиновых трепонемных реакций –

реакцию иммобилизации трепонем(РИТ),

РИФ - абс и её варианты (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

реакцию пассивной гемаглюцинации трепонем(РПГА).

Если серологические реакции использовать в комплексе, это даст возможность выявить заболевание на ранних этапах заболевания.

Реакция Вассермана - это метод связывания комплемента. Для проведения реакции в качестве антигена используют экстракты, которые изготавливаются из бледных трепонем (специфические антигены) и кардиолипин - это экстракт приготовленный из сердечной мышцы быка(неспецифические антигены). Чем больше в исследуемом материале наблюдается бледных трепонем, тем больше степень заболевания и оценивают степень плюсами:

1) - отрицательная; 2) + сомнительная; 3) ++ слабоположительная; 4) +++ положительная; 5) ++++ резкоположительная.

Реакцию Вассермана (Реакция связывания комплемента) в обязательном порядке проводят вместе с осадочными реакциями – Закс - Витебского и Кана. Иммунологическая природа реакций, в общем- то такая же, как и у реакции Вассермана, но для этих реакций требуются более насыщенные антигены, которые при вступлении в реакцию с реагинами сыворотки дают больший осадок. Серонегативный первичный сифилис ставят, если стандартные серологические реакции дали отрицательный результат. Выявление сифилиса реакцией Вассермана эффективно при серопозитивном вторичном сифилисе, здесь результаты теста на 100% верны . На третичной стадии активного сифилиса результаты верны у более половины больных, а на последних стадиях сифилиса, при поражении внутренних органов и систем, результаты верны у половины больных. У больных ранним врождённым сифилисом серологические реакции дают положительный результат почти всегда , а у больных с поздним врождённым сифилисом - почти в 80% случаев.

Принцип РСК заключается в том, что реагины, находящиеся в сыворотке крови больных сифилисом, обладают свойством вступать в соединения с различными антигенами. Образовавшиеся комплексы сортируют введенный в реакцию комплемент. Для индикации комплекса реагины–антиген–комплемент используется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). При наличии комплекса эритроциты выпадают в осадок. Что заметно не вооруженынм глазом. Выраженность гемолиза обозначается врачом ключами: резко положительная 4+, положительная 3+, слабоположительная 2+ ли 1+ и отрицательная. Кроме качественной оценки этих реакций имеется и количественная, имеющая значение в диагностике некоторых стадий сифилиса и при контроле за эффективностью терапии

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) основана на выявлении антител, которые метят специальным флуоресцентным раствором, для того, чтобы в фиолетовых лучах кварцевой лампы выявить соединённые с антигеном антитела. Эта реакция имеет высокую чувствительность и помогает выявить заболевание на первичной стадии серонегативного сифилиса. Так же именно этот тест помогает выявить заболевание у пациентов, у которых заболевание протекает латентно или на поздних стадиях. Существует несколько типов таких реакций и наиболее высоко ценится РИФ-200, при помощи, которой можно выявлять скрытый сифилис и распознать неспецифические результаты КСР. Но, несмотря на высокие показатели РИФа-200, постановка диагноза происходит после проведения всех клинических анализов. РИФ не подходит для наблюдения за пациентами после проведения полного лечения , так как достаточно медленно негативируется на этапе проведения лечения.

Реакция иммуного прилипания (РИП) . В основе этой реакции лежит прилипание трепонем, которые сенсибилизированны сывороткой, к эритроцитам и выпадение их в осадок. Результаты оцениваются по следующей таблице:

Отрицательная- 0-20%

Сомнительная-21-30%;

Слабоположительная-31-50%;

Положительная-51-100%.

По всем показателям РИП очень похожа на РИФ и РИТ. Эта реакция проводится в нескольких случаях, если на основании клинических проявлений, анамнеза, лабораторных исследований сифилис не подтверждается, для контроля за заболеванием после получения необходимого лечения и для подтверждения результатов КСР.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ) .Попав в среду, где есть иммобилизины испытуемой сыворотки и активный комплемент, бледные трепонемы теряют подвижность. На этом и основывается эта реакция. РИТ очень специфична и применяется для распознания скрытого сифилиса, для диагностики беременных, у которых подозревают сифилис и многих других случаев, при которых стандартные серологические тесты мало специфичны. Большой недостаток этой реакции то, что она стоит очень дорого и её проведение - очень сложный процесс. Результаты считываются по процентным данным иммобилизации бледных трепонем:

Отрицательная - до 20%; -сомнительная -21-30%; -слабоположительная -31-50%; -положительная -51-100%.

В связи с тем, что иммобилизины появляются в крови позже других антител, реакция становится положительной немного позже, чем при проведении других реакций. На первичном этапе инфицирования, как правило, наблюдается отрицательная или слабоположительная реакция. На вторичном этапе сифилиса, хотя появление иммобилизинов в сыворотке крови у больного наблюдается до 60%, реакция положительна почти у половины исследуемых. При рецидиве вторичной стадии сифилиса РИТ положительна почти у 90% больных. На третичной стадии развития сифилиса, при поражении внутренних органов, в том числе и нервной системы, когда реакция Вассермана даёт отрицательные результаты, реакция иммобилизации бледных трепонем положительна почти у 100% больных. На раннем этапе врождённого сифилиса реакция имеет положительный результат почти у всех больных, а на позднем этапе врождённого сифилиса - почти у 100% больных. Серопозитивный латентный сифилис подтверждается только после проведения РИТ, которую проводят после получения положительных результатов при проведении других серологических реакций. РИТ не применяют для контроля за заболеванием у больных , которые получили необходимое лечение.

Реакция иммунофлуоресценции абсорбции с бледной трепонемой (FTA-ABS) .Если реакцию проводят для больного, который болен сифилисом и не лечился, то тогда эта реакция даёт положительный результат всегда. Так же высока вероятность выявить инфекцию при помощи FTA-ABS в самом начале заболевания . Реакция обладает большой чувствительностью и специфичностью. Для диагностики латентного сифилиса и в тех случаях, когда уже было проведено несколько тестов и они показали отрицательный результат, но клиника говорит о инфицировании бледной трепонемой, в таких случаях диагноз ставят часто опираясь на результаты FTA-ABS. Буквально через неделю после того, как бледная трепонема попала в организм, начинают вырабатываться специфические антитела IgM, которые со временем перестают появляться и через 2 года уже не определяются. Для того, чтобы понять даёт ли предложенное лечение эффект, проводят специальные тесты, которые определяют специфичность этих антител. Таких тестов на сегодня есть несколько, но проведение их слишком дорого, поэтому для большинства больных эти тесты не проводят.

Гемагглютинационная реакция , которая определяет специфические антитела к бледной трепонеме (микро-РПГА). Для этой реакции в качестве антигена служат трепонемы, поэтому эта реакция очень специфична и даёт правдивые результаты в большинстве случаев.

Иммуноферментный анализ (ИФА) один из наиболее специфичных для диагностики сифилиса. На сегодня чаще всего используют непрямой вариант ИФА. Преимущества этого метода исследования очевидны: не слишком большая стоимость, лёгкость проведения, достаточна высокая точность результата, при помощи этого анализа можно выявить сифилис на ранней стадии, быстрое получение результатов.

В основе метода иммуноблотинга лежит иммуноферментный анализ, который сочетается с электрофорезом. Является одним из самых специфичных анализов и при его помощи происходит подтверждение инфицирования сифилисом.

Полимеразную цепную реакцию (специфический метод исследования) проводят для установления диагноза при скрытых течениях сифилисной инфекции. При проведении ПЦР в испытуемом материале находят возбудителя, даже на первичном этапе заболевания. Обнаруживаемый генетический материал при помощи ДНК делится и таким образом обнаружить возбудителя становится очень просто. При нейросифилисе, когда выявить инфекцию бывает очень затруднительно при проведении других анализов из-за очень низкой чувствительности, при врождённом сифилисе, при первичной стадии серонегативного сифилиса и для постановки диагноза у ВИЧ-инфицированных проведение ПЦР незаменимо. Исследование спинномозговой жидкости при сифилисе проводят, если есть клинические поражения нервной системы на ранней стадии заболевания, при скрытой форме и обязательно ещё до начала лечения. Так же этот анализ назначается для больных нейросифилисом на поздних стадиях сифилиса и при латентной форме. В клинической лаборатории проводят исследование цитоза, содержание белка, реакции Панди и Нонне - Апельта. В серологических лабораториях проводится реакция Вассермана, реакция Ланге, РИФ, РИФю,РИФц, РИТ.

Сифилис многолик. Инфекция, попадая в организм, оставляет следы не только на кожных покровах и половых органах, но и разрушает нервную систему, опорно-двигательный аппарат, легкие, ухудшает слух и зрение. Несмотря на широкий спектр симптомов и вариантов их сочетаний, медики научились выявлять болезнь и безошибочно указывать стадию ее развития.

Общество желает защититься от заражения бледной трепонемой. А потому предусмотрен ряд экспресс-тестов для ранней диагностики сифилиса или выявления носителей инфекции. Правилом стал забор крови на лабораторную диагностику:

• в случаях беременности;
• перед операцией;
• у доноров перед сдачей крови или органов для трансплантации;
• у медицинских работников, учителей, воспитателей, работников сферы общественного питания и др.;
• у военнослужащих;
• у заключенных.

Лабораторный тест и клиническое обследование на сифилис проведут для:

• пациентов с признаками ЗППП;
• половых партнеров и других членов семьи человека с установленным диагнозом «сифилис»;
• младенцев, родившихся от больной матери;
• всех, у кого установлен диагноз другой болезни, передающейся половым путем;
• проверки эффективности терапевтического метода в ходе лечения;
• всех, у кого скрининг дал положительный результат.

Порядок обнаружения инфекции на приеме у венеролога

Из разговора с пациентом врач выясняет:

• есть ли подтвержденный диагноз «сифилис» у партнера;
• случались ли ранее высыпания на половых органах;
• воспалялись ли лимфатические узлы;
• имел ли место незащищенный секс 3-4 недели назад.

В ходе клинического осмотра кожи, половых органов, ануса, слизистых оболочек специалист выясняет схожесть высыпаний и других поражений кожи с теми, что характерны для сифилиса. Тщательно пальпируются периферические лимфоузлы для оценки степени их увеличения.

В случаях наличия сифилид (твердого шанкра, розеол, папул, гранулем) доктор назначает гистоморфологическое исследование. В лаборатории описывают внешний вид и изучают содержимое образования. По результатам судят о стадии заболевания.

Решающий вклад в диагностику сифилиса вносит лабораторный метод выявления возбудителя или следов иммунного ответа на заражение.

Диагноз устанавливают исходя из совокупности данных, полученных после клинического обследования и лабораторных тестов. В исключительных случаях, когда невозможно провести анализы, лечение назначают на основе осмотра.

Диагностика осложнений

Вторичный и третичный сифилис могут давать осложнения, называемые специфическими висцеритами. В процесс могут включаться все органы и системы, но чаще всего венерологи наблюдают поражения:

• печени;
• нервной системы;
• костей;
• сердца.

Особенно опасен сифилис для беременных женщин. Кроме осложненной беременности не исключено внутриутробное или вертикальное (в родовых путях) заражение плода, мертворождение.

Важно вовремя диагностировать не только инфекцию, но и вторичные заболевания. С этой целью кроме специфических тестов и общих анализов мочи и крови проводятся дополнительные обследования (Таблица).

Лабораторные анализы биологических материалов

Лабораторная диагностика сифилиса стала развиваться с 1905 года, когда был обнаружен возбудитель заболевания – бледная трепонема. До этого содержимым сифилид заражали кроликов, которые стопроцентно чувствительны к инфекции. Уже в 1906 году Вассерманом была разработана первая серологическая реакция на сифилис (RW). В 1949 году медицина предложила более специфичную реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), но RW не вытеснена из лабораторий до сегодняшнего дня.

На смену первым анализам приходят современные методы диагностики. Они отличаются по технике проведения и предназначению. В списке актуальных тестов:

• темнопольная микроскопия – предусматривает изучение мазка или соскоба для обнаружения трепонемы в исследуемом субстрате (в быту данное исследование иногда называют «мазок на сифилис»);
• молекулярно-биологические методы выявления специфической ДНК (полимеразная цепная реакция, ДНК-зондирование);
• серологическая диагностика сифилиса по сыворотке крови или спинномозговой жидкости.

Темнопольная микроскопия

Из очагов поражения берут пробы для микроскопического исследования на бледную трепонему. Объектами тестирования являются:

• содержимое сифилид;
• тканевая жидкость;
• ликвор;
• амниотическая жидкость;
• ткань пуповины.

Трепонема получила характеристику «бледная» благодаря устойчивости к действию большинства красителей. Живой микроб хорошо виден в темном поле со специальной подсветкой. Лаборант обращает внимание на морфологические признаки бактерий и наблюдает за характером их движения.

Для гистоморфологического исследования пробы окрашивают серебром (по Морозову) или по Романовскому-Гимзе.

Прямые методы микроскопии применяют для диагностики врожденного заболевания или поздних стадий сифилиса. Проверить его правильность можно прямой реакцией иммунофлюоресценции (РИФ-Тр) или полимеразной цепной реакцией (ПЦР). В первом случае выявить возбудителя помогают противотрепонемные антитела и флюоресцирующий краситель, а во втором – молекулы ДНК бледной трепонемы.

Поиск ДНК возбудителя

Даже единственную молекулу ДНК трепонемы можно обнаружить при анализе крови. Успехи в данной области стали возможными с 1991 года, когда был изобретен тест полимеразной цепной реакции (ПЦР). Носитель наследственной информации размножают в специальных температурных условиях и многократно копируют ферментом – ДНК-полимеразой. После, методом электрофореза, выявляются искомые фрагменты цепи.

Это вполне точный и специфичный тест. За рубежом он стал золотым стандартом диагностики сифилиса. В России ПЦР пока скорее исследовательский, чем клинический.

Другим способом выявляют трепонемы при ДНК-зондировании (гибридизации нуклеиновых кислот). В этом случае денатурированную ДНК соединяют со специфическим зондом. Изменение цвета фильтра, на который нанесены пробы, свидетельствует о заражении.

Серологические способы диагностики

Для различных целей диагностики могут использоваться серологические нетрепонемные и трепонемные тесты. В ходе анализа выявляют антитела к бледной трепонеме в крови.

В качестве экспресс-диагностики или скрининга рекомендуют обращаться к следующим нетрепонемным тестам:

• RPR – тесту быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins);
• RST – тесту отбора реагинов (Reagin Screen Test);
• TRUST – тесту с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой (Toluidin Red Unheated Serum Test);
• USR – тесту определения активных реагинов плазмы (Unheated Serum Reagins);
• VDRL – лаборатории изучения венерических заболеваний (Venereal Disease Research Laboratory);
• микрореакции преципитации (МРП) с плазмой или инактивированной сывороткой;
• реакции связывания комплемента (РСК) и ее разновидности с кардиолипиновым антигеном (РСКк).

В основе методики – поиск антител (IgM и IgG) к липидам поврежденных клеток и липопротеинам мембран возбудителя. Положительный ответ названные анализы показывают уже через неделю после появления первых сифилид.

Антитела собственно к трепонеме выявляют методами:

• ELISA – иммуноферментного анализа – ИФА (Enzymelynked immunosorbent assay);
• FTA – реакции иммунофлюоресценции – РИФ (Fluorescent treponemal antibody);
• RW – реакции связывания комплемента (реакция Вассермана);
• RW с трепонемным антигеном – РСКт;
• TPHA – реакции пассивной гемагглютинации – РПГА (Treponema pallidum haemagglutination assay);
• TPI – реакции иммобилизации бледных трепонем – РИБТ или РИТ (Treponema pallidum immobilization test);
• Western Blot – иммуноблотинга.

Венерологи следуют определенному порядку проведения серологических тестов. В качестве экспресс-диагностики проводят один из нетрепонемных анализов. Учитывается низкая чувствительность в ранней и поздней стадиях инфицирования. Поэтому как отрицательные, так и положительные ответы при определенной клинической картине должны быть перепроверены трепонемными методами.

В разных жизненных ситуациях могут наблюдаться сочетания положительных и отрицательных ответов. Расшифровать их поможет таблица.

Окончательные выводы делает венеролог на основании комплекса данных: клинической картины, гистологических и лабораторных исследований.

Источники:

1. Аковбян В.А., Прохоренков В.И., Новиков А.И., Гузей Т.Н. // Сифилис: иллюстр. рук-во (ред. В.И. Прохоренков). – М.: Медкнига, 2002. – С. 194-201.
2. Дмитриев Г.А., Фриго Н.В. // Сифилис. Дифференциальный клинико-лабораторный диагноз. – М.: Мед. книга, 2004. – С. 26-45.
3. Лосева О.К., Ловенецкий А.Н. Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение сифилиса: рук-во для врачей. – М., 2000.
4. Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Навроцкий А.Л. и др. // Рецепт (приложение: Междунар. науч.-практ. конф. «Современные подходы к диагностике, лечению и профилактике инфекций, передаваемых половым путем», Гродно, 2005). – 2005. – С. 165-169.
5. Панкратов В.Г., Панкратов О.В. // Современные возможности лабораторной диагностики сифилиса и трактовка результатов исследования. – Минск, Белорусская медицинская академия последипломного образования, 2006.
6. Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Крукович А.А. и др. // Здравоохранение. – 2006. – № 6. – С. 35-39.
7. Родионов А.Н. // Сифилис: рук-во для врачей. – СПб.: Питер, 1997. – С. 226-245.
8. Хурадо Р.Л. // ЗППП. – 1997. – № 3. – С. 3-10.
9. Шмидт Б.Л. // Первый Российский конгресс дерматовенерологов: тез. науч. работ. – СПб., 2003.– Т. II. – С. 40-41.
10. Romanowski B., Sutherland R., Flick G.H. et al. // Ann. Med. –1991. – V. 114. – P. 1005-1009.

Данный тест предложил иммунолог из Германии А. Вассерман, и он был назван в его честь – реакция Вассермана, или RW. Основные его достоинства – дешевизна, простота, быстрый результат.

На ЭДС кровь сдается в период скринингов, то есть массовых обследований, для определения заболеваний у здоровых, на первый взгляд, людей, у которых отсутствуют какие-либо тревожные симптомы. В настоящее время такой тест считается устаревшим и заменяется другими, но до сих пор, когда речь идет о нетрепонемном обнаружении сифилиса, применяется такое выражение - «сдать кровь на RW».

Описание анализа крови ЭДС и его назначение

Анализ крови на ЭДС сдается не только теми пациентами, которые подозревают, что у них есть заболевание, либо намереваются подтвердить уже поставленный диагноз, но и в обязательном порядке донорами крови и беременными женщинами. Терапия сифилиса может осуществляться посредством применения антибиотиков, но невылеченное заболевание перерастает в хроническую форму, поражающую все органы человеческого организма, а также характеризуется постоянными ремиссиями и рецидивами.

Проводят тест в следующих случаях:

• Если имеется подозрение на заболевание сифилисом.
• Для подтверждения диагноза - скрытого сифилиса.
• В случае необходимости проверки доноров.
• Тесты при беременности.
• Скрининг.

Сколько времени делается анализ крови на ЭДС? Этот тест очень оперативный. Уже через полчаса можно анализировать результат.

Переносчик

В качестве переносчика сифилиса выступает заболевший пациент и жидкости его тела. Возможно заражение половым путем, через кровь либо посредством применения предметов личной гигиены. Обычно причиной заболевания становятся беспорядочные сексуальные контакты. Чем раньше будет диагностирована патология, тем быстрее и проще становится лечение. Чтобы пройти тест, можно просто сдать натощак кровь. Если не требуются никакие другие анализы, кроме ЭДС, то нужно лишь не употреблять пищевые продукты в течение восьми часов. За день до проведения анализа соблюдать специальную диету не требуется. Обычно кровь берется из вены, однако возможно и из пальца, поскольку не нужно большое ее количество. Что это - ЭДС (анализ крови)? Рассмотрим подробнее.

Если обнаружены антитела

При обнаружении антител можно судить о проникновении инфекции в организм человека в определенной степени. Принимающий участие в тесте кардиолипин является таким веществом, которое извлекается из бычьего сердца. Особый кардиолипиновый раствор соединяется с небольшим количеством крови в стеклянных лунках. Полученный раствор оценивается через полчаса на количество получившегося осадка.

Необходимо помнить о возможных погрешностях. Положительный результат не всегда говорит о том, что пациент болен. Хотя тест является достаточно эффективным, он в любом случае нуждается в подтверждении другими анализами, поэтому кровь нужно сдать несколько раз. Особенно это относится к беременным женщинам. Кроме определения диагноза, данный тест дает возможность выявления стадии заболевания от первой до четвертой. Лечение назначается на основе полученных сведений.

Не все знают, что это - анализ крови на ЭДС.

Расшифровка анализа на сифилис и показатели нормы

При процедуре ЭДС затруднительно говорить об определенной норме или ее нарушениях. Результат в этом случае либо отрицательный, либо положительный. Но помимо этого существуют еще и титры, которые показывают, в каком количестве присутствуют антитела в крови. Каждый конкретный результат расшифровывать должен специалист. Имеется большое количество различных тонкостей, в связи с чем не нужно делать преждевременные выводы и пытаться самостоятельно расшифровать анализ или найти ответ на вопрос, что это такое - анализ крови на ЭДС - с помощью интернета.

Классовая принадлежность клеток lgM или lgG

Указывается классовая принадлежность клеток lgM или lgG: при попадании в организм трепонемы иммунная система начинает бурно реагировать на проникновение инородных клеток. Сначала формируются такие антитела, как lgM. Обнаружить их можно уже через неделю после того, как человек заразился. lgG же появляются в организме приблизительно через месяц и способны сохраняться в нем на протяжении длительного периода, даже если болезнь была успешно вылечена. Присутствие данного класса может служить указанием того, что в организме была выработана устойчивая реакция иммунитета к бледной трепонеме.

При отрицательном результате и указанных при этом титрах со словом lgG рядом с ними можно судить о вторичном характере сифилиса. То есть в крови имеются антитела к бледной трепонеме, однако это антитела памяти, способные долго циркулировать в организме уже после выздоровления пациента. Подобный анализ в некоторых случаях может быть положительным, хотя на самом деле он ложноположительный. Для точного определения требуется учет всех предыдущих результатов исследований и наблюдение за уменьшением титра. Все последующие анализы при этом могут продолжать давать положительный результат.

Расшифровку анализа крови на ЭДС должен проводить высококвалифицированный специалист.

Как определить степень поражения?

Он может давать как положительный, так и отрицательный результат. Поражение тем серьезнее, чем большее количество плюсов имеется в показателях.

• слабоположительная реакция - + и ++ (если плюс один, то результат является сомнительным);
• положительная - +++;
• резко положительная - ++++.

По результатам анализа указываются титры антител. При проведении исследования для контроля терапии титры позволяют определить, выздоравливает ли пациент. Как правило, больной после лечения находится под наблюдением специалистов на протяжении года. За этот период он несколько раз проходит тестирование. Об эффективности терапии также свидетельствует снижение титров за год в четыре и более раз. При отсутствии иммуноглобулинов IgM в крови можно говорить об отсутствии возобновления инфекции. Присутствие же IgG возможно в течение длительного времени после лечения, а порой даже всю жизнь.

Что это? Нужно помнить о том, что у этого метода есть определенные недостатки. Исследование назначается для того, чтобы подтвердить подозрения, однако на достоверный результат рассчитывать можно далеко не во всех случаях.

Реакция Вассермана способна иметь положительные показатели не только при сифилисе, но и при малярии, волчанке, туберкулезе. К сожалению, более эффективный и точный метод все еще отсутствует. Зачастую такой анализ проводится одновременно с остальными для более полной картины. У беременных женщин результат может оказаться положительным даже при отсутствии каких-либо патологий. Он способен стать ложным также во время менструации. Сколько делается анализ крови на ЭДС, лучше узнать заранее.

Перепроверить тест

При получении положительного результата необходимо перепроверить его несколько раз. Пациент имеет право сдавать другие тесты и требовать подтверждения, поскольку ЭДС не является надежным на 100 %. Если же появляются язвы, шанкры, при этом они не болят и не кровоточат, можно судить о том, что произошло заражение. Нужно сразу же обратиться к специалисту. Пациент должен узнать все подробности терапии, действие и состав назначенных препаратов.

При беременности возможно профилактическое лечение, и от него не нужно отказываться. Если женщина до беременности лечилась от сифилиса (либо на ранних ее сроках), врач может назначить профилактический медикаментозный курс. Также пациент имеет право требовать абсолютной анонимности. О диагнозах и терапии врач распространяться не может.

Не нужно откладывать лечение, поскольку на начальных этапах оно происходит быстрее. Необходимо отказаться от жирных и тяжелых продуктов, алкоголя и всего, что может осложнить процесс выздоровления.

Мы рассмотрели ЭДС - анализ крови. Что это, теперь понятно.

Экспресс-тест на сифилис: достоинства диагностики, показания, как подготовиться и показания к проведению

Сифилис - довольно опасная патология, возникновение которой провоцируется проникновением в организм бледной трепонемы (Treponema pallidum). Заболевание опасное и при несвоевременной терапии или игнорировании проявлений, чревато критическими последствиями, в том числе летальным исходом.

Терапия венерического недуга продолжительная и трудоемкая. Своевременное выявление недуга и целесообразное лечение - оптимальный способ предупреждения развития осложнений, улучшения общего состояния и самочувствия. Прогноз будет благоприятным только в случае выявления сифилиса на ранних стадиях.

Патология коварна, характеризуется медленным и прогрессирующим течением. Обнаруживается зачастую случайно при прохождении обследования при подозрении на иной недуг, и поэтому зачастую выявляется поздно.

Поздние стадии болезни чреваты необратимыми и тяжелыми поражениями не только внутренних органов и систем, но и ЦНС. Человек может на протяжении длительного периода даже не догадываться о наличии заболевания и заражать партнеров. Риск инфицирования при интимной близости с зараженным - 30-35%. Продолжительность скрытого течения составляет примерно 1,5 месяца. Симптоматика недуга разнообразна и изменяется с прогрессированием патологии.

При появлении первой тревожной симптоматики - твердого шанкра на кожных покровах, необходимо в незамедлительном порядке обратиться за помощью специалиста и пройти обследование.

Не стоит пытаться самостоятельно вылечить недуг, это чревато непредсказуемыми последствию и чаще приводит к развитию осложнений. Сегодня существует много препаратов для терапии болезни, а также методов определения наличия в организме трепонем. Диагностирование патологии заключается в изучении анамнеза жизни, осмотре пациента, сборе анализов (биологического материала) и дальнейшего исследования жидкостей, в том числе крови, проведении серодиагностики. Также проводят дополнительные лабораторные исследования мочи, крови и биохимии крови.

Самый популярный и весьма эффективный способ - экспресс-тест на сифилис. Действие теста схоже по принципу с тестом на беременность. Единственное отличие - вместо урины используется кровь.

Достоинства метода исследования

Способ выявления сифилиса и его возбудителя пользуется спросом и в отличие от остальных методик обладает рядом преимуществ.

К основным из них относят:

1. Быстрый результат. Практически любой экспресс тест на сифилис дает результат в течение получаса. В некоторых случаях результата придется ждать несколько часов, но это все равно быстрее, чем исследование материала в лабораториях.
2. Цену. Приспособление в среднем стоит 300 рублей, что в разы дешевле диагностики в условиях лаборатории.
3. Возможность приобрести, как в любой аптеке, так и интернет магазине (анонимно).
4. Возможность проведения самостоятельно, в домашних условиях.
5. Простоту и доступность. Для прохождения теста не нужно особых знаний и умений. Все что нужно сделать - ознакомиться с аннотацией и при прохождении теста придерживаться всех рекомендаций.
6. Анонимность. Для проведения исследования нет надобности в посещении медучреждения. Не нужно оставлять контактную информацию.

Показания

Провести исследование может каждый желающий.

Но чаще всего проведение экспресс-теста на сифилис рекомендовано:

• во время вынашивания плода;
• в случае возникновения тревожной симптоматики;
• при отсутствии возможности диагностирования в медучреждении;
• людям, которые часто меняют половых партнеров;
• тем, кто страдает иными половыми инфекциями;
• перед тем, как сдать кровь (донорство);
• при близком бытовом контакте с зараженным;
• людям, которые по каким-то причинам не пользуются методами контрацепции;
• если был незащищенный половой контакт.

Подготовительный этап и порядок выполнения исследования

С целью получения достоверного результата, экспресс-тест на сифилис следует проводить с учетом нескольких правил.

1. Категорически не рекомендуется за один-два дня до исследования пить спиртные напитки.
2. За тридцать минут до анализа следует отказаться от курения.
3. Тест необходимо проводить натощак и предпочтительно до обеда.
4. Перед проведением необходимо тщательно изучить инструкцию.

Несоблюдение этих рекомендаций чревато искажением результата. Проводится тест очень просто. Никакими особыми навыками и умениями обладать не нужно. Для начала следует хорошо вымыть руки (желательно мылом, обладающим антибактериальными свойствами). Нельзя проводить процедуру, если тест был только что куплен, и он еще не нагрелся до комнатной температуры (зимой, к примеру). Вскрывать упаковку следует только после окончания подготовки.

Чтобы полоска, которая уже извлечена, лежала на горизонтальной и ровной поверхности. К тому же она должна быть чистая и сухая.

Перед исследованием палец протирают спиртовой салфеткой (ее внутренней стороной). После прокола верхней фаланги скарификатором, каплю крови, которая выступит, следует набрать в пипетку и выдавить в ячейку индикатора. Далее в ячейку добавляется реагент - пара капель. Приблизительно по истечении четверти часа можно узнать результат. Если результат появился на индикаторе позднее (более чем через полчаса), считать его верным не рекомендовано.

Принцип работы

Работа теста схожа по принципу с тестом для определения беременности. Только вместо урины используется кровь. Результат будет зависеть от вида приспособления и правильности проведения процедуры.

Анализ крови РПГА: виды и эффективность тестов, достоверность результата и стоимость

Различают несколько разновидностей тестов. Они могут быть трепонемными и нетрепонемными. Первые являются очень специфическими, потому отсеивание здоровых людей происходит тщательно. Единственный их недостаток - пониженная чувствительность на ранних стадиях.

Анализ крови РПГА (расшифровывается аббревиатура, как реакция пассивной гемагглютинации) - специфический тест. Заключается метод в склеивании красных кровяных телец, на поверхности которых скапливаются антигены возбудителя. Подобная реакция происходит при добавлении крови инфицированного, которая содержит антитела к спирохете.

Что касательно чувствительности анализа крови РПГА и подобных тестов, в частности РИФ, то на ранних стадиях она составляет порядка 70-80%, на более поздних - 99%.

Анализ крови РПГА - далеко не единственный качественный метод, позволяющий определить болезнь. Не менее эффективным является ИФА. При помощи иммуноферментного анализа можно выявить антиген и антитела к ним, возбудителей самых разных инфекционных недугов. ИФА - это и скрининговый и подтверждающий способ одновременно. Этот метод способствует выявлению любой половой инфекции, а также сифилис на любом этапе его развития.

Применение нетрепонемных тестов

Помимо трепонемных тестов, в частности анализа крови РПГА выделяют еще и нетрепонемные. Такие приспособления способствуют обнаружению в сыворотке антител к фосфолипидам, разрушающимся из-за недуга. Подобные приспособления стоят дешевле, чем трепонемные. Для их проведения используется не белок-антиген (являющийся специфическим для трепонемы), а его альтернатива (кардиолипиновый антиген).

Из-за высокой чувствительности результат исследований часто ложноположительный. Применение таких тестов рекомендовано при массовом скрининге населения. Если же возбудитель выявлен, проводится повторная проверка, но уже с применением трепонемного теста.

Характеристики самых эффективных тестов

Сегодня существует много тестов для определения венерической патологии.

К самым точным и проверенным относят следующие виды:

1. Креатив МП-сифилис. Высокоэффективный и чувствительный тест (99%) с наличием двойной комбинации антигенов. Определяет антитела к возбудителю сифилиса, как в крови, так плазме и сыворотке. Для проведения исследования используется пара капель цельной крови. Результат можно узнать по истечении десяти минут. О наличии в организме трепонем будет сигнализировать появление двух розово-фиолетовых полос. Если в области контроля есть только одна полоска - человек здоров.
2. Cito Test Syphilis. Этот тест является иммунохроматографическим. Оснащен тест кассетой, буфером, пипеткой. Все остальное нужно докупить. Примерно через десять минут после анализа можно узнать результат. Наличие двух четких линий сигнализирует о наличии патологии.
3. ИммуноХром - антиТР-Экспресс. Выявляет антитела к возбудителю сифилиса. Результат можно узнать по истечении четверти часа. Об инфицировании сигнализирует появление двух фиолетовых полосок. В комплект входят: буфер, спиртовые салфетки, пипетка, тест полоска, скарификатор.
4. Сифилис-тест. Набор реагентов способствует определению антител к трепонеме способом ИХА (иммунохроматографического анализа). Наличие двух параллельных полос свидетельствует о наличии сифилиса. Результат можно узнать через десять минут.
5. Профитест. Тест с чувствительностью в 99.5%. В комплекте: тест кассета, ланцет, пипетка, спиртовые салфетки. Результат будет известен по истечении четверти часа. Наличие двух полос сигнализирует об инфицировании.

Зачастую результаты исследований точные. Ложным или недостоверным результат может быть из-за неправильного проведения процедуры.

Экспресс-диагностика сифилиса

Когда-то реакция Вассермана считалась самым точным исследованием, определявшим наличие трепонемы в крови. Сейчас этот метод используется все реже, потому что на смену ему пришли более современные реакции, чувствительные к определению антител к трепонеме на первых неделях заражения. Одно из таких эффективных исследований крови или сыворотки – экспресс-диагностика сифилиса. Метод эффективен как для первичного обследования при подозрении на наличие венерического заболевания, так и для выявления вируса у доноров или у беременных женщин, для пациентов прошедших лечение и для больных со скрытой формой заболевания.

В зарубежных клиниках экспресс-диагностика сифилиса имеет название Rapid Plasma Reagin. Еще чаще встречается сокращенное обозначение теста RPR. При заражении организма трепонемой в крови формируются защитные антитела класса IgG и IgM, которые готовы противостоять тому липопротеиноподобному материалу, который образуется в клетках и тканях организма, пораженных трепонемой. Этот тест относится к нетрепонемным, потому что он направлен не на выявление вируса, а на точное определение количества антител в крови. ЭДС позволяет установить точный срок заболевания.

ЭДС является серологическим тестом. Его можно сдать в любой клинике. При желании пациент может пройти анонимное обследование крови на сифилис с выдачей результатов анализа без указания фамилии. Сдав анализы, ожидать результаты диагностики придется недолго. Исследование крови длится примерно полчаса, но выдается ответ в руки на вторые сутки.

Для исследования на сифилис берется небольшое количество крови из вены. Обязательным условием получения верного ответа является посещение клиники пациентом натощак. Для обнаружения антител при экспресс-диагностике сифилиса кровь смешивается с кардиолипиновым раствором. Тестирование схоже с реакцией преципитации. На специальной стеклянной пластине происходит реакция, которая выявляет антитела. В результате на стекле появляется осадок и хлопья. По ним ставят диагноз, который выражается в плюсах. Как и в реакции Вассермана, 4 + свидетельствуют о точном присутствии трепонемы и антител в организме. Однако метод экспресс-диагностики сифилиса может давать и ложные результаты, когда в организме есть антитела, вызванные другими заболеваниями. Для подтверждения положительного результата с небольшим количеством + необходимо сдать еще и трепонемный тест.

Лабораторная диагностика сифилиса

Микроскопическое исследование

Пункция регионарных лимфатических узлов

Серологическая диагностика

Реакция Вассермана (РВ)

Обычно РВ ставится с двумя или тремя антигенами. Наиболее часто применяется отличающийся высокой чувствительностью кардиолипиновый антиген (экстракт из сердца быка, обогащенный холестерином и лецитином) и трепонемный антиген (обработанная ультразвуком взвесь анатогенных культуральных бледных трепонем). Совместно с реагинами сыворотки крови больного эти антигены образуют иммунный комплекс, способный адсорбировать и связывать комплемент. Для визуального определения образованного комплекса (реагины + антиген + комплемент) в качестве индикатора применяется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент связан в 1 фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), гемолиз не наступает - эритроциты выпадают в легко заметный осадок (РВ положительная). Если в 1 фазе комплемент не связан вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, он будет использован гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза при постановке РВ оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза ++++ или 4+ (РВ резкоположительная); едва начавшийся гемолиз +++ или 3+ (РВ положительная); значительный гемолиз ++ или 2+ (РВ слабоположительная); непонятная картина гемолиза ± (РВ сомнительная); полный гемолиз - (реакция Вассермана отрицательная).

Помимо качественной оценки РВ имеется количественная постановка с различными разведениями сыворотки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагинов определяется максимальным разведением, еще дающим резко положительный (4+) результат. Количественная постановка РВ имеет значение в диагностике некоторых клинических форм сифилитической инфекции, а также при проведении контроля за эффективностью лечения. В настоящее время реакция Вассермана ставится с двумя антигенами (кардиолипиновый и трепонемный озвученный штамм Рейтера). Как правило, РВ становится положительной на 5-6 неделе после заражения у 25-60% больных, на 7-8 неделе - у 75-96%, на 9-19 неделе - у 100%, хотя в последние годы иногда раньше или позже. При этом, титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимальной величины (1:160-1:320 и выше) в случае появления генерализованных высыпаний (сифилис вторичный свежий). При позитивации РВ выставляется диагноз первичного серопозитивного сифилиса.

При вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе РВ положительная у 100% больных, но у истощенных больных с ослабленным иммунитетом может наблюдаться отрицательный результат. Впоследствии титр реагинов постепенно понижается и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:120.

При третичном сифилисе РВ положительная у 65-70% больных и обычно наблюдается низкий титр реагинов (1:20-1:40). При поздних формах сифилиса (сифилис внутренних органов, нервной системы) положительная РВ наблюдается в 50-80% случаев. Титр реагинов колеблется от 1:5 до 1:320.

При скрытом сифилисе положительная РВ отмечается у 100% больных. Титр реагинов от 1:80 до 1:640, а при позднем скрытом сифилисе от 1:10 до 1:20. Быстрое снижение титра реагинов (вплоть до полной негативации) во время лечения свидетельствует об эффективности лечения.

Недостатки реакции Вассермана - недостаточная чувствительность (в начальной стадии первичного сифилиса отрицательная). Она негативная также у 1/3 больных, если они в прошлом лечились антибиотиками, у пациентов третичным активным сифилисом с поражениями кожи и слизистых, костно-суставного аппарата, внутренних органов, центральной нервной системы, при позднем врожденном сифилисе.

Недостаточная специфичность - реакция Вассермана может быть положительная у лиц, которые ранее не болели и не болеют сифилисом. В частности ложноположительные (неспецифические) результаты РВ отмечаются у больных, которые страдают системной красной волчанкой, лепрой, малярией, злокачественными новообразованиями, поражениями печени, обширными инфарктами миокарда и другими заболеваниями, а иногда у совершенно здоровых людей.

Кратковременная ложноположительная реакция Вассермана выявляется у некоторых женщин перед родами или после них, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, после наркоза, приема алкоголя. Как правило, ложноположительная РВ выражена слабо, чаще с низким титром реагинов (1:5-1:20), положительная (3+) или слабо положительная (2+). При массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов составляет 0,1-0,15%. Для преодоления недостаточной чувствительности, пользуются постановкой на холоде (реакция Колляра) и одновременно она ставится с другими серологическими реакциями.

Осадочные реакции Кана и Закса-Витебского

Преимущество - быстрота получения ответа (черезмин). Результаты оцениваются по количеству выпавшего осадка и величины хлопьев. Выраженность определяют как КСР - 4+, 3+, 2+ и отрицательная. Следует отметить, что ложноположительные результаты наблюдаются чаще, чем при РВ. Как правило, экспресс-метод применяется при массовых обследованиях на сифилис, при обследовании в клинико-диагностических лабораториях, соматических отделениях и больницах. На основании результатов экспресс-метода диагноз сифилиса выставлять запрещается, исключается его применение у беременных, доноров, а также для контроля после лечения.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

РИБТ имеет значение при дифференциальной диагностике для отграничения ложноположительных серологических реакций от реакций, обусловленных сифилисом. Поздно становится положительной чем РВ, РИФ и поэтому для диагностики заразных форм сифилиса ее не применяют, хотя во вторичном периоде сифилиса она положительная у% больных.

В третичном периоде сифилиса с поражением внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы РИБТ положительная в% случаев (РВ часто отрицательная).

Необходимо помнить, что РИБТ может оказаться ложноположительной в случае наличия в исследуемой сыворотке трепонемоцидных препаратов (пенициллин, тетрациклин, макролиты и др.), которые вызывают неспецифическую иммобилизацию бледных трепонем. С этой целью кровь на РИБТ исследуется не ранее 2 недель после окончания приема антибиотиков и других лекарственных средств.

РИБТ как и РИФ в процессе лечения медленно негативируются, поэтому она не применяется в качестве контроля в процессе лечения.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Результаты РИФ учитываются по интенсивности свечения бледных трепонем в препарате (желто-зеленое свечение). При отсутствии противотрепонемных антител в сыворотке, бледные трепонемы не определяются. При наличии антител выявляется свечение бледных трепонем, степень которого выражается в плюсах: 0 и 1+ - отрицательная реакция; от 2+ до 4+ - положительная.

РИФ относится к групповым трепонемным реакциям и ставится в разведении исследуемой сыворотки в 10 и 200 раз (РИФ-10 и РИФ-200). РИФ-10 считается более чувствительной, однако часто выпадают неспецифические положительные результаты, чем при постановке РИФ-200 (отличается более высокой специфичностью). Как правило, РИФ становится положительной раньше, чем РВ - положительная при первичном серонегативном сифилисе у 80% больных, у 100% во вторичном периоде сифилиса, всегда положительная при скрытом сифилисе и в% случаев при поздних формах и врожденном сифилисе.

Специфичность РИФ повышается после предварительной обработки исследуемой сыворотки сорбентом-ультраозвученным трепонемным антигеном, который связывает групповые антитела (РИФ - абс).

Показания к постановке РИБТ и РИФ - диагностика скрытого сифилиса для подтверждения специфичности комплекса липидных реакций в случае предположения сифилитической инфекции на основании положительной РВ. Положительные РИБТ и РИФ являются доказательством латентного сифилиса. При ложноположительной РВ при различных болезнях (системная красная волчанка, злокачественные новообразования и др.) и если повторные результаты РИБТ и РИФ отрицательные, это свидетельствует о неспецифическом характере РВ. Подозрение на поздние сифилитические поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы при наличии у больных отрицательной РВ. Подозрение на первичный серонегативный сифилис, когда у пациентов при многократных исследованиях отделяемого с поверхности эрозии (язвы), при пунктате из увеличенных регионарных лимфатических узлов бледная трепонема не обнаруживается - в этом случае ставится только РИФ - 10.

При обследовании лиц с отрицательной РВ, которые имели длительные половые и бытовые контакты с больными сифилисом, учитывая вероятную возможность лечения их в недавнем прошлом противосифилитическими препаратами, вызвавшими негативацию РВ. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA - enzymelinked immunosorbent assay) - метод разработан E.Engvall и соавт., S.Avrames (1971). Сущность состоит в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя с антителом исследуемой сыворотки крови и выявлении специфического комплекса антиген-антитело при помощи меченной ферментом антивидовой иммунной сыворотки крови. Это позволяет оценивать результаты ИФА визуально по степени изменения окраски субстрата под действием фермента, входящего в состав конъюгата. Недостоверные результаты ИФА могут возникать в результате недостаточного разведения инградиентов, нарушения температурного и временного режимов, несоответствии рН растворов, загрязнении лабораторной посуды, неправильной технике промывки носителя.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Техника взятия крови для серологических реакций

Для исследования на экспресс-метод кровь берегся из кончика пальца, как это делается при ее взятии на СОЭ, но берут кровь на 1 капилляр больше. Экспресс-метод можно также ставить с сывороткой крови, полученной при помощи венопункции. Если возникает необходимость исследования крови в отдаленных лабораториях, вместо крови можно пересылать сухую сыворотку (метод сухой капли). Для этого на следующий день после взятия крови, сыворотку отделяют от сгустка и набирают в стерильный шприц в количестве 1 мл. Затем сыворотку выливают в виде 2 отдельных кружков на полоску плотной писчей бумаги (вощаная бумага или целлофан) размером 6×8 см. На свободном крае бумаги пишется фамилия, инициалы обследуемого и дата забора крови. Бумагу с сывороткой защищают от прямых солнечных лучей и оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Сыворотка засыхает в виде небольших кружочков блестящей желтоватой стекловидной пленки. После этого, полоски бумаги с высушенной сывороткой свертывают как аптечный порошок и отсылают в лабораторию, указывая диагноз и с какой целью исследуется.

Серологическая резистентность

Псевдорезистентность - после проведенного лечения несмотря на положительные серологические реакции бледная трепонема в организме отсутствует. Антигена в организме нет, но продолжается выработка антител, которые фиксируются при постановке серологических реакций.

Серологическая резистентность может развиваться вследствие:

• неполноценного лечения без учета давности и стадии заболевания;
• недостаточной дозы и в частности из-за неучета массы тела пациентов;
• нарушения интервала между введением препаратов;
• сохранения в организме бледных трепонем несмотря на проведенное полноценное специфическое лечение, из-за их стойкости к пенициллину и другим химиопрепаратам в случае наличия скрытых, осумкованных очагов поражения во внутренних органах, нервной системе, лимфатических узлах, которые малодоступны для антибактериальных препаратов (нередко бледные трепонемы обнаруживаются в тканях рубца через много лет после окончания терапии, в лимфатических узлах иногда удается обнаружить бледные трепонемы через 3-5 лет после противосифилитической терапии);
• снижения защитных сил при различных заболеваниях и интоксикациях (эндокринопатии, алкоголизм, наркомания и др.);
• общего истощения (приемом пищи бедной витаминами, белками, жирами).

Кроме этого, нередко выявляется ложная позитивация серологических реакций, не связанная с наличие у больных сифилиса и вызванная:

• сопутствующими неспецифическими заболеваниями внутренних органов, нарушениями сердечнососудистой системы, ревматизмом, дисфункциями эндокринной и нервной систем, тяжелыми хроническими дерматозами, злокачественными новообразованиями;
• поражениями нервной системы (тяжелые травмы, сотрясение головного мозга, психические травмы);
• беременностью; хроническими интоксикациями алкоголем, никотином наркотиками; инфекционными болезнями (малярия, туберкулез, вирусный гепатит, дизентерия, сыпной, брюшной и возвратный тифы).

Указанные факторы могут оказывать влияние на иммунологическую реактивность организма как в период активного развития сифилитических проявлений, так и во время их регресса.

Анализ ЭДС: описание, назначение и расшифровка анализа на сифилис

ЭДС, или экспресс диагностика сифилиса, имеет несколько названий. Она известна, как реакция Вассермана или как антикардиолипиновый тест. Это один из самых популярных и эффективных тестов для определения бледной трепонемы, возбудителя такого заболевания, как сифилис.

Описание и назначение анализа крови ЭДС

Анализ крови на сифилис: подготовка и назначение

Анализ ЭДС сдают не только те, кто подозревает у себя это заболевание или хочет подтвердить уже известный диагноз, но и все доноры крови, а также беременные женщины в обязательном порядке. Сифилис можно вылечить при помощи антибиотиков, однако непролеченный сифилис перетекает в хроническую форму, которая поражает все органы в теле человека, а также протекает в виде постоянных рецидивов и ремиссий.

Переносчиком сифилиса является заболевший человек, жидкости его тела. Заразиться можно через кровь, половым путем или же через средства личной гигиены. Чаще всего причиной является беспорядочная половая жизнь. Чем раньше будет обнаружена болезнь, тем проще и быстрее можно будет ее вылечить.

Для того, чтобы пройти тест, достаточно сдать кровь натощак. Если кроме ЭДС никаких анализов больше сдавать не нужно, требуется только не принимать пищу в течение 8 часов. Соблюдать особую диету за день до сдачи крови не нужно. Как правило, кровь сдают из вены, но можно брать из пальца, так как большого количества крови не требуется.

Суть анализа ЭДС заключается в выявлении антител к бледной трепонеме в крови пациента.

Если антитела обнаружены, значит, инфекция попадала в организм в той или иной мере. Кардиолипин, участвующий в тесте, представляет собой вещество, извлекаемое из бычьего сердца. Специальный кардиолипиновый раствор смешивается с небольшим количеством крови пациента в стеклянных лунках. Через 30 минут полученный раствор оценивают на количество образовавшегося осадка.

Стоит помнить о погрешностях. Не всегда положительный результат означает, что человек болен. Несмотря на эффективность теста, его всегда нужно подтверждать другими анализами, сдавать кровь несколько раз. Особенно это касается беременных женщин. Помимо постановки диагноза, тест позволяет определить стадию от 1 до 4. Лечение назначается с учетом всех данных.

Расшифровка и норма анализа на сифилис

Анализ ЭДС: расшифровка показателей

В случае с ЭДС трудно говорить о какой-либо норме или отклонении от нормы. Результат либо положительный, либо отрицательный. Однако помимо этого указывают еще и титры, показывающие, в каком количестве в крови присутствуют антитела.

Расшифровать каждый конкретный результат может только врач. Существует множество тонкостей, поэтому не стоит делать поспешных выводов, а также пытаться расшифровать анализ самому или через интернет.

Указывается класс клеток lgG или lgM:

• Как только трепонема попадает в организм, начинается бурная реакция иммунной системы на вторжение инородных клеток.
• Первым делом формируются антитела lgM. Их можно обнаружить через неделю после заражения.
• Антитела lgG появляются примерно через месяц и могут сохраняться долгое время даже после успешного лечения болезни. Наличие класса lgG может указывать лишь на то, что организм выработал устойчивую иммунную реакцию к бледной трепонеме.
• Если в результате стоит слово «отрицательный», но титры указаны и рядом находится слово lgG, это может означать, что сифилис вторичный. То есть антитела к бледной трепонеме в крови присутствуют, но это так называемые антитела памяти, которые могут долгое время циркулировать в крови уже после выздоровления.

Такой анализ иногда дает даже положительный результат, который на самом деле является ложноположительным. Чтобы определить это, нужно учитывать все предыдущие результаты анализов и следить за снижением титра. При этом все дальнейшие анализы могут оставаться положительными.

Больше информации об анализе на сифилис можно узнать из видео.

Рядом с различными буквами и титрами можно увидеть плюсы:

• Если стоит минус, значит результат отрицательный
• Если один плюс, то сомнительный
• Два плюса – слабоположительный
• Три плюса – положительный
• Четыре плюса – резко положительный

Помимо ЭДС можно сдать и другие анализы - РИФ, проводимая с помощью люминесцентного микроскопа, или РПГА, основанная на склеивании эритроцитов.

Стоит учитывать все результаты. Если все они положительные, значит сифилис есть. Если положительный только один, велика вероятность ложноположительного результата. При наличии двух положительных результатов назначают дополнительную проверку.

Положительный результат анализа крови ЭДС

Действие при положительном результате анализа

Необходимо помнить, что ЭДС анализ имеет свои недостатки. Назначение анализа заключается в подтверждении подозрений, но не всегда можно рассчитывать на достоверный результат.

Реакция Вассермана может быть положительной не только при сифилисе, но и при туберкулезе, волчанке, малярии. К сожалению более точного и эффективного метода пока нет. Часто этот анализ сдают вместе со всеми остальными, чтобы увидеть картину целиком. У беременных результат может быть положительным без наличия каких-либо заболеваний. Даже при месячных можно получить ложноположительный результат.

Тем, кто получил положительный результат ЭДС, следует придерживаться следующих рекомендаций:

1. Необходимо несколько раз перепроверить результаты анализа. Пациент имеет право потребовать подтверждения, сдать другие тесты, поскольку надежность ЭДС анализа не 100%.
2. Если помимо анализа стали появляться шанкры, язвы, но они еще не кровоточат и не болят, это признак заражения. Необходимо срочно обратиться к врачу.
3. Пациент имеет право узнать все подробности лечения, а также состав и действие препаратов, с помощью которых будет проводиться лечение.
4. Во время беременности могут назначит профилактическое лечение, от которого не стоит отказываться. Врач назначает профилактические курсы препаратов, если женщина лечилась от сифилиса до беременности или во время беременности на ранних сроках.
5. Пациент вправе потребовать полную анонимность. Врачебная тайна запрещает распространятся о диагнозах и лечении. В случае несоблюдения анонимности, лечебное учреждение привлекается к административной ответственности.
6. Не стоит затягивать с лечением. На начальных стадиях лечение проходит быстро.

По ходу лечения нужно будет сдавать анализ ЭДС несколько раз. Скорее всего его придется сдавать неоднократно на протяжении всей жизни, причем довольно долго он может оставаться ложноположительным.

Только врач может сделать вывод, когда пациент становится незаразным и его можно снять с учета (обычно при наличии одного плюса в анализе). На время лечения нужно отказаться от алкоголя, тяжелой и жирной пищи, а также всего, что осложнит выздоровление. Отрицательный результат ЭДС станет свидетельством отсутствия заболевания, рекомендуется повторять исследование ежегодно.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Экспресс-тест на сифилис

Диагностика сифилиса включает в себя:

• Изучение анамнеза жизни и заболевания.
• Клинический осмотр пациента.
• Исследование материала с пораженных участков (лимфатические узлы, ликвор, амниотическая жидкость) на предмет обнаружения бледной трепонемы.
• Проведение серодиагностики (нетрепонемные и трепонемные тесты).
• Проведение дополнительных лабораторных исследований (общий анализ крови и мочи, биохимия крови и др.).

Нетрепонемные тесты позволяют обнаружить в сыворотке крови антитела к фосфолипидам, которые разрушаются вследствие данного заболевания.

К нетрепонемным тестам относятся:

• Антикардиолипиновый тест (тест быстрых плазменных реагинов, RPR, экспресс-тест на сифилис).
• Реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (реакция Вассермана).
• Микроскопический тест.

Реакцию Вассермана можно проводить также с трепонемным антигеном. Поэтому в зависимости от того, какой материал используется в реакции, данное исследование можно отнести, как к трепонемным, так и к нетрепонемным.

Описание и принцип действия антикардиолипинового теста (RPR).

Возбудителем сифилиса является Treponema palidum. Данный возбудитель имеет несколько чужеродных для организма человека антигенов, которые по строению аналогичны кардиолипину. Иммунная система пациента реагирует на кардиолипиновые антигены выработкой специфических антител класса IgG и IgM.

Данный экспресс-тест на сифилис относится к числу нетрепонемных. Исследование позволяет выявить антифосфолипидные антитела в крови больных первичным сифилисом в 75% случаях. На стадии вторичного сифилиса результат анализа положительный в 100% обследованных. Наиболее эффективным принято считать проведение теста спустя неделю после образования сифилитической язвы или через 3- 5 недель после заражения.

Проведение данного метода диагностики актуально для скрининга при беременности и для обследования полового партнера. Также, тест используют для оценки эффективности назначенного лечения. После адекватно проведенной терапии результат антикардиолипинового теста становится отрицательным.

В связи с тем, что тест относится к ряду неспецифических возможно развитие ложноположительного результата. Это обусловлено тем, что данные антитела могут быть выявлены при ряде других инфекций, вызванных бледной трепонемой.

При условии, если результат данного метода диагностики показал положительные результаты, то рекомендуется проконсультироваться с врачом (дерматовенерологом) и провести повторное исследование, используя специфический трепонемный тест.

Исследование следует проводить натощак. Пациента ставят в известность, что на протяжении 8 часов до проведения анализа противопоказано употреблять продукты питания. С утра можно выпить стакан воды.

На сегодняшний день сдать анализы на сифилис можно в медицинских учреждениях как государственного, так и частного типа. Исследования на сифилис в лабораториях любого типа должны проводиться анонимно.

Для экспресс теста на сифилис используют антиген, в состав которого входит кардиолипин, лецитин и холестерин, а также кровь пациента. Для лучшей визуализации результата исследования используют частицы угля. При положительном результате в сыворотке образуются черного цвета флокулянты.

При титре от 1:2 до 1:320 и выше результат экспресс-теста для подтверждения диагноз сифилис принято считать положительным.

Отрицательным считают результат при полном отсутствии антител. Сомнительная реакция - низкие титры антител.

Также, в аптеке можно купить набор теста на сифилис для использования в домашних условиях.

Анализ крови РПГА: подготовка к сдаче и анализ полученных результатов

Более достоверными тестами для диагностики заболевания принято считать исследования, при помощи которых можно обнаружить специфические антигены возбудителя заболевания или комплексы антиген-антитело.

К числу таких трепонемных тестов относятся:

• Реакция иммунофлюресценции (РИФ).
• Реакция пассивной агглютинации (РПГА).
• Иммуноферментный анализ (ИФА).
• Реакция иммобилизации Treponema palidum.
• Иммуноблодинг.

Что такое анализ крови РПГА?

При помощи данного исследования удается выявить агглютинацию тех эритроцитов, на поверхности которых были зафиксированы антигены возбудителя сифилиса. Анализ следует проводить в комплексе с тестом быстрых плазменных реагинов.

Это обусловлено тем, что при одиночном проведении анализа крови на сифилис методом РПГА возможно развитие отрицательного результата исследования в первые 4 недели после заражения, при первичном сифилисе и при скрытом течении заболевания.

Подготовка пациента к сдаче анализа:

1. Исследование показано проводить натощак.
2. Следует ограничить прием жидкости (вечером и утром можно выпить по стакану простой воды).
3. Анализ рекомендовано сдавать впервой половине дня.
4. На протяжении 30 минут строго противопоказано курить.
5. Недопустимо содержание в крови алкоголя.

В случае не соблюдения всех вышеуказанных рекомендаций возрастает риск развития ложноположительных результатов.

На сегодняшний день, данный метод исследования постепенно вытесняют более современные и высокочувствительные (экспресс методы, РПГА и т. д.). Но, тем не менее, в странах СНГ его еще используют в качестве скринингового исследования.

Расшифровка данных анализа крови на RW:

В случае резко положительного результата исследования титр составляет от 1:2 до 1:800.

Экспресс-анализ на сифилис, цена

Экспресс-анализ на сифилис основан на выявлении в крови больных антифосфолипидных антител. Экспресс-метод диагностики сифилиса (RPR) относится к разряду неспецифических серологических тестов. Метод RPR является прототипом реакции Вассермана (RW), он довольно чувствителен и дает позитивный результат через сразу после появления первичного шанкра (соответствует термину 3 – 5 недель после инфицирования). Экспресс-анализ на сифилис является эффективным в 90% случаев для первичного сифилиса и в 100% – для вторичного.

Существует серологическая нетрепонемная и трепонемная диагностика. Трепонемные тесты являются основными, с их помощью выявляется возбудитель заболевания.

Экспресс анализ крови на сифилис является нетрепонемным или неспецифическим тестом. И, тем не менее, данный метод прост, удобен и позволяет сдать анализ на сифилис быстро. Результаты его готов в этот же день!

Когда назначается экспресс-тест на сифилис?

• положительной симптоматике;
• во время беременности;
• перед донорской сдачей крови;
• перед трансплантацией органов;
• после случайного сексуального акта;
• при беспорядочной половой жизни;
• перед операцией;
• детям, рожденным от больных матерей;
• после бытового контакта с человеком, у которого имеется бледная трепонема;
• при смене партнера.

Подготовка к сдаче экспресс-анализа на сифилис

Экспресс-анализ на сифилис не нуждается в предварительной подготовке!

Как проводят анализ?

1. Специально обученный медицинский персонал берет у пациента кровь из вены (не менее 5 мл).
2. Затем в лабораторных условиях производят осаждение эритроцитов и лейкоцитов, после чего в сыворотку крови добавляется кардиолипиновый антиген.
3. Если через определенный интервал времени в сыворотке крови выпадает темный осадок, в ней имеются антифосфолипидные антитела, формирующие комплекс антиген-антитело. Результат в таком случае считается положительным.

Преимущества

Экспресс-диагностика сифилиса имеет ряд преимуществ:

• быстрота проведения (результат готов в этот же день);
• анонимность;
• возможность регулярного контроля лечения.

Результаты и расшифровка экспресс-анализа на сифилис

Отрицательный результат экспресс-анализа на сифилис бывает в случаях, когда:

1. Человек не болен.
2. Если болезнь находится на стадии инкубации, т.е. когда 3 – 5 недель с момента инфицирования еще не прошли, а антитела к кардиолипину еще не выработались. В таком случае необходимо сделать контрольный тест через 2 недели.
3. Поздняя стадия. После вторичной стадии концентрация антител существенно снижается.

Ложноположительный результат теста RPR на сифилис бывает при следующих случаях:

• Наличие серьезных заболеваний (корь, пневмония, диабет, опухоли, туберкулез, заболевания аутоиммунного генеза, гепатит вирусной этиологии и др.);
• Беременность;
• Алкоголизм;
• Недавняя вакцинация в анамнезе;
• Наркозависимость.

Положительный результат экспресс-анализа на сифилис должен подтвердиться дополнительной полной диагностикой. Врач проводит комплексы полных исследований. Если все они дают также положительный результат, то речь действительно идет о заболевании и требуется лечение сифилиса.

Эффективность

Экспресс-анализ крови на сифилис RPR является качественным методом диагностики и может использоваться в большинстве случаев подозрений на бледную трепонему. Если результат теста положительный, пациент должен пройти обязательное обследование у дерматовенеролога и повторно сдать кровь на специфическое исследование (трепонемное).

К основным специфическим методам диагностики сифилиса относят:

В нашей клинике вы сможете сдать кровь на сифилис экспресс-методом RPR и получить результаты в тот же день!

Кроме того мы выполняем все анализы, направленные на диагностику сифилиса, в этой связи диагноз будет поставлен точно!

Среди венерических заболеваний занимает первые позиции по распространенности. Заболевание передается от больного к здоровому преимущественно половым путем. Диагностика сифилиса – сложный, поэтапный процесс, который не всегда приносит результат.

Подозрение на сифилис – к какому врачу идти?

Большое распространение заболевание получило потому, что многие молодые люди просто не знают, как определить сифилис, какие обследования необходимо пройти. Лечением половых инфекций занимаются врачи венерологи или дерматовенерологи, так как в большинстве случаев подобные инфекции сопровождаются повреждением кожных покровов. Медики советуют с профилактической целью обследоваться каждому пациенту репродуктивного возраста. Болезнь часто протекает в скрытой форме, поэтому выявить ее можно не всегда.

Методы диагностики сифилиса

Диагностические мероприятия по выявлению заболевания основываются на клинических и лабораторных данных. Диагноз «сифилис» ставится только после получения положительных результатов лабораторного исследования. Ранняя диагностика сифилиса исключает прогрессирование заболевания. Первичный сифилис определяется исследованием отделяемого твердого шанкра эрозивных папул. Среди основных методов лабораторной диагностики сифилиса необходимо выделить:

1. Бактериоскопию.
2. Серологическое исследование (специфическое и неспецифическое).
3. Гистологию (при ).
4. Микроскопию (исследование нативного препарата, отделяемого эрозивных или язвенных высыпаний, пунктата из лимфоузла).

Микробиологическая диагностика сифилиса

Основу данного типа обследования составляет бактериоскопический метод диагностики сифилиса. Он предполагает обнаружение T.pallidum в материале, забранном из очагов воспаления:

• твердый шанкр;
• эрозивные нарушения;
• лимфоузлы;
• спинной мозг.

Предварительно врач протирает место забора материала тампоном с физраствором, затем раздражает поверхность эрозии специальной петлей, пока из нее не покажется тканевая жидкость.

При этом избегают смешивания материала с кровью. Жидкость помещается на предметное стекло. Препарат, полученный таким способом, исследуется с помощью микроскопа. Методы микробиологической диагностики сифилиса основываются на обнаружении возбудителя в материале. При отрицательном результате исследование проводят несколько дней подряд для полного исключения болезни.

Серологическая диагностика сифилиса

Для выявления и подтверждения диагноза «сифилис» в случае поздних и скрытых форм болезней основы диагностики составляет серологический метод. В большинстве случаев для диагностики сифилиса используют . Метод предполагает исследование венозной крови пациентов, которые обнаруживают антитела к антигенам возбудителя. Такой анализ на бледную трепонему помогает выявить заболевание даже при отсутствии явных клинических симптомов.

В зависимости от состава используемых для диагностики веществ, серологические методы подразделяют на:

1. Специфические (трепонемные).
2. Неспецифические (нетрепонемные).

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты – это метод диагностики, использующий в качестве основы специфические антигены Treponemapallidum. Метод используется как для постановки, так и для подтверждения диагноза, для дифференциальной диагностики сифилиса. Все специфические тесты имеют высокую чувствительность и точные результаты. Механизмы проведения специфических тестов неодинаковы, поэтому они имеют различные показания к применению. К трепонемным тестам относят следующие методы лабораторной диагностики сифилиса:

1. Реакцию связывания комплемента (реакция Вассермана, РВ) с трепонемным антигеном – РСКт.
2. Реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ.
3. Реакцию иммунофлюоресценции – РИФ. Применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс; РИФц – реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью или спинномозговой жидкостью.
4. Реакцию пассивной гемагглютинации – РПГА.
5. – ИФА.
6. Иммуноблотинг.

Нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты на сифилис используются в качестве отборочных и не подходят для окончательной диагностики, выставления диагноза. Они активно применяются для обследования больших групп населения с целью профилактических осмотров при возникновении неблагоприятной эпидемиологической ситуации. Тест обладает простотой проведения, имеет высокую чувствительность. Результат диагностики оценивается врачом. Чувствительность неспецифических тестов при ранних формах заболевания составляет около 70 %, а при вторичном сифилисе – 100 %.

К нетрепонемным тестам диагностики сифилиса относятся:

1. RPR (RapidPlasmaReagins).
2. Тест с инактивированной сывороткой – МРП (микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном).

Данные флокуляционные тесты характеризуются простотой оценки. В ходе реакции образуется комплекс «антиген + антитело», который формирует хлопья, различимые с помощью увеличительного стекла. Роль антигена в тесте выполняет кардиолипиновый антиген, который получают из сердечной мышцы быка. Связь с антигенами возбудителя сифилиса при этом отсутствует, поэтому тесты и получили название нетрепонемные.

Экспресс-диагностика сифилиса

Современные методы диагностики сифилиса предполагают выявление заболевания на ранних стадиях. В качестве метода экспресс-диагностики используется RapidPlasmaReagin(RPR). Тест направлен на определение концентрации в крови антител к возбудителю сифилиса. При заражении бледная трепонема в организме формирует защитные антитела IgG и IgM. Наличие их в образце забранной крови является косвенным доказательством присутствия в организме бледной трепонемы. Данная диагностика сифилиса помогает установить точный срок продолжительности заболевания, время инфицирования.

Анализы на сифилис – расшифровка

Современная лабораторная диагностика сифилиса основывается следующих методах:

• нетрепонемный тест – RPR или VDRL;
• трепонемные тесты – РИФ и РПГА.

В странах СНГ для диагностики сифилиса чаще применяют реакцию Вассермана, также реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ. Оценку полученных результатов производит только врач, который учитывает клинические проявления заболевания, стадию патологии, состояние пациента. С примерными результатами исследований можно ознакомиться в таблице ниже.ото

Дифференциальная диагностика сифилиса

Когда у врача после первичного осмотра возникает подозрение на сифилис, он направляет пациента для сдачи крови на RV. Если результаты исследования подтвердили наличие бледной трепонемы в организме, проводится дифференциальная диагностика с определением стадии заболевания. При первичном сифилисе чаще бывают положительными РИФ и ИФА, однако это не позволяет выставить диагноз «сифилис».

Диагностика вторичного сифилиса не вызывает затруднений – резким положительным является результат по всем серологическим реакциям. РИБТ положительна больше чем у 50 % больных. Третичная форма сифилиса практически не вызывает затруднений. Серологические реакции положительные в 50–90 % случаев. Диагностика скрытого серопозитивного сифилиса основывается на серологических реакциях с подтверждением результата с помощью РИБТ.

Сифилис является одной из самых известных и опасных венерических болезней. Сложно найти инфекцию, для лабораторных исследований которой применялся бы такой широкий спектр методов, как для сифилиса.

Лабораторное распознавание сифилиса отличается от диагностики других бактериальных инфекций тем, что, в отличие от многих патогенных микроорганизмов, Тreponema pallidum очень требовательна к составу искусственных питательных сред, и на обычных средах не размножается. Она растет на средах, содержащих почечную или мозговую ткань, в строго анаэробных условиях при температуре 35 °С.

Поэтому культивирование бледных трепонем на искусственных питательных средах возможно, но требует сложных специальных сред и анаэробной установки. При этом культуральные бледные трепонемы быстро теряют свою болезнетворность и меняют биологические (биохимические, физиологические) и морфологические свойства. Методы стабильного получения культур до настоящего времени отсутствуют.

Невозможность культивирования патогенных трепонем заставляет искать альтернативные методы определения микроорганизмов или антител к ним. Наряду с традиционными, открытыми в начале 20-го века, разрабатываются новые, более чувствительные и специфические методы. Эти методы должны удовлетворять следующим требованиям:

∎ высокая чувствительность и специфичность;

∎ соответствие метода исследования стадии и форме заболевания, а также распространенности инфекции в популяции;

∎ возможность получения объективных результатов и их прогнозирование;

∎ возможность автоматизации исследования, учета, архивирования и анализа полученных результатов;

∎ стандартизуемость процесса диагностического исследования, учета и анализа полученных результатов

Разработанные к настоящему времени методы лабораторной диагностики сифилиса можно классифицировать различным образом. Они могут быть разделены по различным критериям:

• прямые и непрямые (косвенные);
• тесты на антитела и прямые тесты на антиген;
• трепонемные (специфические) и нетрепонемные (неспецифические);
• отборочные (скрининговые), подтверждающие и диагностические;
• приборные и бесприборные.

Каждый вид тестов имеет свои преимущества и ограничения.

Прямые и непрямые методы дагностики сифилиса

Прямые тесты - это методы непосредственного выявления возбудителя в материале из очагов поражения. Прямые методы диагностики позволяют установить окончательный диагноз сифилитической инфекции, т.к. основаны на обнаружении T. pallidum в биологических образцах. Исследования проводятся с помощью темнопольной микроскопии и молекулярно-биологических методов (прежде всего ПЦР). Эти методы используются при наличии видимых сифилитических поражений.

Прямые методы используются для диагностики ранних форм заболевания, первичного и вторичного сифилиса с клиническими появлениями (эрозивно-язвенными элементами); для подтверждения врожденного сифилиса (для анализа используют ткань пуповины, плаценты, органы плода, отделяемое слизистой оболочки носа, содержимое пузырей, отделяемое с поверхности папул).

Прямые методы:

• микроскопия в темном поле (темнопольная микроскопия, ТПМ; dark field microscopy, DFM) и другие методы микроскопии;
• метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ; direct immunofluorescent assay, DFA)
• молекулярно-биологические методы детекции ДНК бледной трепонемы (полимеразная цепная реакция, ПЦР; polymerase chain reaction, PCR) и другие тесты на амплификацию нуклеиновых кислот (МАНК; nucleic acid amplification test, NAAT)
• ДНК-зондирование или гибридизация нуклеиновых кислот (ГНК) ;
• заражение кроликов инфицированным материалом от больных (rabbit infectivity test-RIT). Этот метод является старейшим, но в силу экономических, организационных трудностей, длительности в практике медицинских учреждений не используется.

Серологические (непрямые) методы дают возможность выявлять в крови больных или антитела, специфичные для определенного возбудителя инфекционного заболевания, или антигены (в большинстве случаев - белки) самих микроорганизмов. В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Методы серологической диагностики сифилиса базируются на выявлении антител к возбудителю сифилиса в сыворотке крови или в спинномозговой жидкости.

Серологические методы очень важны при диагностике сифилиса из-за того, что возбудитель сифилиса не культивируется на питательных средах in vitro, практически незаметен в «светлом поле» микроскопа, не окрашивается практически никакими стандартными лабораторными красителями и плохо сохраняется вне организма больного. Кроме того, в последние годы довольно часто наблюдается скрытое течение сифилитической инфекции, что затрудняет получение биологического материала, пригодного для прямой идентификации T. pallidum.

Трепонемные и нетрепонемные тесты

1. Нетрепонемные тесты служат для выявления антител к нетрепонемным антигенам.

Распространенные нетрепонемные тесты - это липидные (реагиновые) реакции. Эти тесты связаны не с определением антител против трепонемы, но с определением антител IgM и IgG к липоидным материалам из разрушенных клеток организма больного сифилисом. Чаще всего эти тесты применяются для скрининга из-за простоты и дешевизны. В них используется нетрепонемный кардиолипиновый антиген, а сами тесты проводятся в разных вариантах:

1) флокуляционные тесты (продукт реакции выпадает в виде хлопьев): микрореакции на стекле с липидными антигенами -экспресс-метод диагностики (микрореакции преципитации - РМП), VDRL (Venereal Disease Research Laboratory test), RPR (Rapid Plasma Reagin test) и др.;

2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами - реакция Вассермана (РСКк);

3) осадочные реакции, которые не используются в настоящее время (реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса - Витебского и др.).

2. Трепонемные тесты - выявление антител к трепонемным антигенам.

В трепонемных тестах чаще всего используются антигены Treponema pallidum, нативные (штамм Никольса) или рекомбинантные. Тест, в котором используются живые спирохеты - реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ), в настоящее время выводится из клинической практики из-за дороговизны и сложности.

Групповые антигены являются общими для двух или более видов микробов, входящих в один род, а иногда относящихся и к разным родам. Специфические антигены имеются только у данного вида микроба или даже только у определенного типа либо подтипа внутри вида. Определение специфических антигенов позволяет дифференцировать микробы внутри рода, вида, подвида и даже типа (подтипа).