В диагностике хламидиоза из всех существующих методов самым достоверным признан метод ПЦР.* Метод полимеразной цепной реакции для диагностики хламидиоза имеет чувствительность 98-100%.
Преимущества ПЦР диагностики при хламидиозе
1. Прямое определение хламидий в биоматериале.
Ряд методов, применяемых в диагностике хламидиоза, например, метод ИФА, выявляет только антитела и/или антигены возбудителя, что не является прямым подтверждением хламидийной инфекции, а свидетельствует лишь о возможном ее наличии.
Метод полимеразной цепной реакции (метод ПЦР) – молекулярно-биологический метод, который направлен на выявление специфических для хламидий фрагментов ДНК и напрямую указывает на наличие инфекции.
2. Высокая специфичность.
Специфичность метода ПЦР в диагностике хламидиоза достигает 100%. Данный факт обусловлен тем, что в биоматериале, подвергаемом анализу, выявляется фрагмент ДНК, генетический материал хламидий. ДНК является неотъемлемой частью любого микроорганизма и не может существовать вне возбудителя, кроме случаев применения антибактериальных препаратов, когда ДНК возбудителя может определяться в течении месяца.
Этого нельзя сказать об иммунологических методах анализа, при которых часто встречаются ложноположительные реакции из-за перекрестно-реагирующих антител и антигенов.
3. Высокая чувствительность.
Для выполнения ПЦР анализа достаточно присутствия в биоматериале единичных клеток хламидий. Аналитическая чувствительность ПЦР анализа 10-100 клеток в биоматериале, когда у других тестов 103-105 клеток (микросокпический, бактериологический методы).
Существующие рутинные методы диагностики хламидийной инфекции – микроскопические, иммунологические, бактериологические – не позволяют установить возбудителя у 20-40% инфицированных лиц, в то время как метод ПЦР позволяет выявить хламидии практически у 100% больных.
4. Универсальность метода ПЦР.
Наряду с выявлением ДНК хламидий в исследуемом биоматериале метод ПЦР позволяет одновременно обнаружить несколько возбудителей, например, трихомонад, гонококков и др.
5. Скорость получения результата.
Проведение ПЦР анализа полностью автоматизировано, что позволяет получить результаты в самые оптимальные сроки, и, как следствие, дает возможность получить быстрое и эффективное лечение.
6. Диагностика латентных и вялотекщих форм хламидиоза.
Урогенитальная хламидийная инфекция отличается бессимптомным течением, например, более чем у 70% женщин хламидиоз протекает бессимптомно. Поэтому ранее рутинные методы диагностики не позволяли выявить эту инфекцию. В последние годы в связи с широким применением метода ПЦР в клинической практике фиксируется больше случаев заболевания.
Хламидиоз: особенности
Неосложненная форма хламидиозной инфекции протекает у мужчин чаще в форме воспаления уретры (уретрит), у женщин – в форме слизисто-гнойного воспаления слизистой оболочки шейки матки (цервицит), уретры (уретрит).
Преимущественно урогенитальная хламидиозная инфекция протекает в малосимптомной форме и начинает проявляться на стадии осложнений.
Для полноценной диагностики урогенитального хламидиоза методом ПЦР берут соскоб из уретры, мочу, секрет предстательной железы у мужчин, и соскоб из цервикального канала, влагалища у женщин.
К распространенным осложнениям урогенитального хламидиоза относят:
- орхоэпидидимит, эпидидимит, простатит, стриктуру уретры;
- цистит,
- ВЗОМТ (воспалительные заболевания органов малого таза);
- эрозивные изменения шейки матки;
- бесплодие.
К возможным осложнениям хламидиоза при распространении за пределы урогенитального тракта относят:
- хламидийный конъюктивит;
- хламидийный фарингит;
- хламидийный гепатит,
- болезнь Рейтера (сочетающий в себе поражение мочеполовых органов, суставов и коньюнктивы); спаечную болезнь специфической этиологии.
Проведение ПЦР-диагностики хламидийной инфекции актуально для пациентов:
- в целях профилактического обследования;
- с характерными жалобами или подтвержденным диагнозом заболевания, передаваемого половым путем;
- при планировании беременности;
- обследование беременных;
- при отягощенном акушерско-гинекологическом анамнезе;
- с подозреним на урогенитальный хламидиоз;
- перед оперативными вмешательствами на половых органах и органах малого таза;
- с подозрением на коньюктивит, артрит хламидийной этиологии.
В лабораториях CMD для проведения ПЦР исследования имеется лучшее оборудование и высококвалифицированный персонал. На всех этапах ПЦР исследования – от взятия биоматериала до выдачи готового результата - соблюдаются все требования менеджмента качества, чем полностью исключается попадание чужеродного генетического материала и получение ложноположительного результата.
34 541
Как известно, всякая болезнь имеет свои, присущие только ей, признаки. Но это не имеет никакого отношения к хламидиозу.
Хламидиоз
– это болезнь, которая не имеет чётких симптомов, присущих только ей, а иногда и вовсе протекает бессимптомно. И даже если какие-то проявляются, то чаще всего они схожи с признаками других ЗППП.
Поэтому для постановки диагноза решающими являются лабораторные методы исследования. В отличие от многих других заболеваний диагноз хламидиоз – чисто лабораторный.
Кто, прежде всего, должен обследоваться на хламидиоз?
- Мужчины и женщины, имеющие много половых партнеров, особенно случайных.
- Лица, у половых партнёров которых обнаружен хламидиоз, даже при отсутствии жалоб и симптомов. Ведь осложнения хламидиоза могут развиваться даже при его бессимптомном течении. Риск заражения партнера составляет около 90%.
- Женщины, страдающие бесплодием более 2 лет, даже в том случае, если половой партнёр обследован и здоров.
- Женщины с эрозиями шейки матки, цервицитами, воспалением яичников (особенно при планировании беременности). Причем влагалищный мазок при этом может быть нормальный.
- Женщины с нарушением протекания беременности: самопроизвольные выкидыши, преждевременные роды, многоводие, повышение температуры неясного происхождения во время настоящей беременности.
Что исследуют?
Для обнаружения хламидий необходимо произвести забор материала. Это может быть соскоб, содержащий клетки больного органа — влагалища, шейки матки, секрет простаты, соскоб из уретры, конъюнктивы глаза. Таким материалом также может быть кровь, моча и сперма у мужчин.
Какие анализы назначают при хламидиозе и насколько они могут быть полезны?
Сначала мы остановимся на возможных методах обследования, а затем сделаем вывод, какие из них наиболее предпочтительны.
2. Иммуноцитологический анализ — Реакция прямой иммунофлюоресценции (РИФ или ПИФ).
Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. Для этого материал, полученный при соскобе, обрабатывают специальными антителами, которые непосредственно обработаны флуоресцирующим веществом. Эти антитела
связываются со специфическими антигенами хламидий. Затем при люминесцентной микроскопии хламидийные включения в клетках определяют по зелёному или желто-зеленому свечению.
Иммуноцитологический метод используется как при острой, так и при хронической фазе заболевания.
Существенным недостатком РИФ является большое количество ложноотрицательных и ложноположительных результатов. Ложноотрицательные результаты чаще всего связаны с нарушением правил забора биологического материала. Ложноположительные результаты могут быть следствием сочетанных инфекций урогенитального тракта, когда вместе с хламидией присутствует другая микробная флора. Кроме всего прочего, РИФ носит очень субъективный характер, т.к. зависит от опыта и личной оценки лаборанта. Поэтому РИФ дает очень высокий процент ложноположительных результатов и не может считаться достоверным. Недостатком РИФ также является то, что с её помощью нельзя оценить результаты лечения.
При урогенитальном хламидиозе точность метода составляет около 50%.
3. Иммуноферментный анализ (ИФА).
ИФА является методом непрямого выявления бактерий, т.е. возбудитель не обнаруживается непосредственно, а определяются специфические антитела
(IgG, IgA, IgM) к нему. В основе метода лежит способность иммунной системы вырабатывать антитела
(иммуноглобулины
, Ig
) в ответ на внедрение чужеродных агентов.
Преимущества ИФА заключаются в том, что он позволяет не только выявить возбудителя заболевания, но также определить на какой стадии оно находится (острой или хронической) и оценить эффективность проведенного лечения. Преимуществом также является автоматизация метода и быстрота его проведения.
Как оценивают результаты?
При инфицировании хламидиями специфические антитела
появляются на 5-20-й день заболевания. При этом появление каждого класса антител происходит на определённой стадии заболевания.
- При первичном инфицировании сначала появляются IgМ, затем – IgA, и в последнюю очередь – IgG.
- Самыми первыми после первичного инфицирования (через 5 дней) появляются IgM, которые защищают организм от возможного распространения инфекции. Они являются маркерами острой стадии заболевания. К 10-му дню количество IgM в крови достигает пика. Затем их уровень начинает снижаться, и появляются IgA. В течение небольшого периода времени могут обнаруживаться параллельно IgM и IgA антитела . Этот период свидетельствует о разгаре инфекционного процесса.
- IgA можно обнаружить через 10 дней от момента появления первичных симптомов заболевания. Они защищают слизистые оболочки от проникновения бактерий глубоко в ткани. Высокий уровень IgA в выделениях слизистых оболочек говорит о хорошо функционирующем местном иммунитете.
- Затем, через 15 — 20 дней после внедрения в организм Chlamydia trachomatis в крови появляются IgG, а уровень IgA снижается.
- Острый первичный процесс характеризуется высоким уровнем (титром) IgM в сочетании с низким титром IgG.
- При повторном заражении отмечается быстрое нарастание титра IgG и IgА и практически полное отсутствие IgM.
- При хроническом течении выявляются специфические IgG и А, концентрации которых не изменяются на протяжении длительного времени.
- При излечении через 1,5-2 месяца IgA и IgM в крови не обнаруживаются, а IgG могут сохраняться в течение нескольких лет, однако их уровень снижается в 4-6 раз.
- Длительно обнаруживаемые IgG указывают на перенесённую хламидийную инфекцию.
- При обострении хламидиоза количество IgA и IgG увеличивается в несколько раз.
- Эффективность проведенного лечения определяется по наличию IgA. Если через 2 месяца после курса лечения в крови обнаруживаются IgA — это означает, что инфекция осталась.
Необходимо отметить, что специфические антитела
, вырабатываемые к хламидиям, не обеспечивают стойкого иммунитета против них.
Точность этого анализа на хламидиоз составляет около 70 %. Это связано с тем, что антитела
к хламидиям могут присутствовать и у здоровых людей вследствие ранее перенесенного заболевания, а также определяться при респираторных и других видах хламидийных инфекций.
4. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
С помощью ПЦР выявляется специфический участок или фрагмент ДНК хламидий в исследуемом материале, поэтому в сравнении с другими методами спутать хламидии с какой-то другой инфекцией невозможно. Он эффективен как в острой, так и в хронической фазе заболевания. При этом для анализа нужно совсем немного материала, результаты же готовы уже через 1-2 дня.
Для ПЦР исследования материалом может быть соскоб из уретры или цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи, соскоб с конъюнктивы глаз, кровь.
При диагностике первичного заражения более информативным является выявление данной инфекции в местах изначальной локализации, т.е. материалом должны быть соскобы из половых путей. Ложноположительные результаты ПЦР могут быть в случае нарушения процесса забора, транспортировки материала и проведения самого анализа.
Важно!
Для оценки эффективности лечения ПЦР исследование нельзя проводить ранее чем через месяц после курса антибиотикотерапии, т.к. можно получить ложноположительные результаты. Это связано с тем, что при выявлении фрагмента ДНК хламидии невозможно оценить, насколько жизнеспособна сама микробная клетка. В этом случае жизнеспособность хламидий, а также связанная с ней возможность рецидивов болезни оценивается с помощью микробиологического метода. Если хламидия нежизнеспособна, то, несмотря на наличие фрагмента ДНК, микробные клетки не будут расти в клеточной культуре.
На сегодняшний день точность этого методы является самой высокой — до 100 %.
Данный метод рекомендован как предпочтительный в диагностике хламидийной инфекции.
5. Микробиологическое исследование (культуральный метод) с определением чувствительности к антибиотикам.
Суть этого метода состоит в том, что исследуемый материал высевается на специальную среду и выращивается. Затем по характеру роста и другим признакам идентифицируется возбудитель. Культуральный метод является наиболее чувствительным, он позволяет не только выявить жизнеспособные хламидии, но и подобрать антибиотик, к которому чувствителен данный микроорганизм.
Материалом для исследований может служить соскоб из уретры, шейки матки, секрет простаты, соскоб с конъюнктивы глаза.
За месяц до исследования нельзя применять антибиотики.
Микробиологическое исследование предпочтительнее проводить в следующих случаях:
- Для оценки эффективности проведенного антибактериального лечения.
- Для выявления чувствительности к антибактериальным препаратам.
- Для выявления хламидий у лиц с иммунодефицитами (ВИЧ инфицированные, онкологические больные после лучевой и химиотерапии, лица, получающие иммунодепрессанты, др.).
Недостатками культурального метода диагностики хламидиоза являются трудоемкость, дороговизна и длительность исследования. Также необходимо особое оснащение лаборатории и очень высокая квалификация персонала. Кроме того, данный метод, как никакой другой, требует безукоризненного соблюдения правил при заборе материала, транспортировке и хранении.
Реальный срок получения результатов этим методом – не менее семи дней.
Выявляемость хламидий при посеве составляет до 90 %.
6. Экспресс-диагностика.
В основе всех методов экспресс-диагностики хламидиоза лежит ферментспецифическая реакция и иммунохроматография. Для этого используются специальные наборы для экспресс-диагностики, которые позволяют визуально оценивать результаты уже через 10-15 минут. Это очень быстрый и удобный метод, но его точность составляет всего 20-25 %.
Выводы.
- Не существует ни одного метода, который бы в 100% случаев выявлял хламидии. Поэтому в большей части случаев лабораторная диагностика должна включать в себя сочетание не менее двух методов.
- Самые чувствительные анализы на хламидиоз — ПЦР (ДНК — диагностика) и микробиологический анализ. Они являются «юридическим стандартом» при диагностике хламидиоза.
- В случае первичного заражения до применения антибиотиков чаще всего достаточно одного ПЦР исследования.
- При хронических процессах — ПЦР или микробиологический тест, или РИФ+ИФА.
- При вероятности перехода возбудителя в L-форму – ИФА.
- Для оценки эффективности лечения в идеале используется микробиологическое исследование. При невозможности его проведения – ПЦР + ИФА.
- Для определения стадии болезни – ИФА.
- У больных с иммунодефицитами ИФА не информативен, в идеале использовать микробиологический метод.
- Не стоит особо полагаться на результаты по определению чувствительности хламидий к антибиотикам. Ведь, как известно, микроорганизмы ведут себя по-разному в пробирке (in vitro) и в живом организме(in vivo).
По статистике, в мире ежегодно заболевает хламидиозом 100 млн. человек. Согласно информации ВОЗ, урогенитальный хламидиоз – это самая частая инфекция, передающаяся половым путём. Заболеванию чаще подвержены женщины и мужчины, но заражаются и дети. Ежегодно 100 тыс. женщин остаются бесплодными по причине хламидиоза. Инфекция является причиной мертворождённого плода, преждевременных родов и смерти новорождённых.
Для успешного лечения важно правильно поставить диагноз. Сегодня мы рассмотрим точный метод диагностики хламидиоза – анализ ПЦР. Узнаем, как следует готовиться к анализу и что нельзя делать мужчинам и женщинам перед сдачей материала.
Хотя инфекция чаще передаётся половым путём, возможно внутриутробное заражение плода или во время родов. Заболевание вызывает атипичная бактерия Chlamidia trachomatis. Возбудитель заболевания наполовину вирус, наполовину бактерия, и поэтому трудно поддаётся обнаружению.
Хламидиоз — заболевание, передающееся половым путем
Инкубационный период заболевания 2-4 недели. Пути заражения хламидиозом – сексуальный вагинальный и анальный. Бытовой путь заражения происходит в сауне и бане. В домашних условиях возможен перенос инфекции с загрязнённых рук на глаза или при пользовании общим полотенцем. Дети заражаются во время родов при прохождении по родовым путям заражённой матери.
Какие заболевания вызывает хламидия
Заражение хламидиозом происходит во время контакта выделений из половых органов со слизистой оболочкой партнёра. Частые последствия инфекции:
- У мужчин заболевание протекает в виде воспаления мочевыводящего канала – уретрита.
- Другие частые клинические формы хламидиоза у мужчин – цистит и простатит.
- Воспалительный процесс шейки матки у женщин – цервицит.
- Проктит – воспаление прямой кишки.
- Воспаление фаллопиевых труб и внутренней оболочки матки – сальпингит и эндометрит.
- Внематочная беременность. При внематочной беременности в 25–50% случаев выявляютсяхламидии в мазке.
- Бесплодие у женщин имужчин развивается в результате воспалительного процесса или рубцовых изменений органов малого таза.
Хламидиоз относится к восходящему типу инфекций. Они начинаются с нижнего мочеполового тракта, а поднимаясь выше, вызывают воспалительные и спаечные процессы, угрожающие бесплодием. Хламидиоз у мужчин вызывает нарушение потенции и бесплодие.
Круг заболеваний расширяется при ослабленной иммунной системе. При этом поражаются органы дыхания в виде хламидийной пневмонии. Развиваются хламидийные артриты и конъюнктивиты.
Выявление хламидиоза затрудняется тем, что в 50–67% случаев инфекция протекает бессимптомно или проявляется признаками, похожими на другие инфекции половых путей.
В настоящее время самый чувствительный метод выявления хламидиоза – анализ ПЦР.
Он обладает 100% специфичностью и является достоверным методом диагностики, не требующим подтверждения другими анализами. Аббревиатура ПЦР – полимеразная цепная реакция. Принцип анализа основан на обнаружении ДНК хламидии.
Желательно использовать несколько методов диагностики
У анализа ПЦР имеются преимущества перед другими методами:
- Реакция очень чувствительна – обнаруживает мельчайшую частичку возбудителя заболевания.
- АнализПЦР – это быстрый метод обследования. Постановка анализа длится несколько часов, а ответ выдают на следующий день.
- Методпозволяет обнаруживать непосредственно возбудителя болезни, а не реакцию организма после инфицирования. Это преимущество позволяет выявить возбудителя даже в инкубационном периоде болезни, когда у человека нет признаков заражения.
- ПЦР –это 100% специфичный метод. Он основан на обнаружении ДНК, специфичной только для этого возбудителя болезни. ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) – это формула (код) генетической цепочки всех живых созданий от вируса до слона. У каждого существа своя специфическая цепочка ДНК.
- Отсутствие противопоказаний для постановки реакции.
Комплекс лабораторных исследований помогут выявить возбудителя и стадию заболевания
Метод ПЦР имеет и некоторые недостатки:
- Анализможет давать ложноположительный результат при несоблюдении правил проведения анализа. Поэтому лаборатория для проведения ПЦР оснащена фильтрами воздуха. Требование к фильтрации в лаборатории составляет 99, 9%.
- ПЦР даёт ложноотрицательный ответ даже при развёрнутой картине заболевания, если не соблюдены правила взятия материала.
- Положительный результат возможен в случае перенесённой и вылеченной инфекции, потому что метод определяет и живого, и мёртвого возбудителя болезни.
Интерпретировать результат должен лечащий врач. В случае если врач сомневается в активности хламидиоза при положительном ответе ПЦР, он назначает ИФА (иммуноферментный анализ). Метод ИФА определяет иммунный ответ, который уточняет стадию хламидиоза – острого процесса или перенесённой инфекции.
Подготовка к забору материала для ПЦР у мужчин
Что нельзя делать мужчинам, перед тем как сдавать анализ:
- за 3 часа до забора мочи нельзя мочиться;
- использовать растворы для дезинфекции;
- применять бактерицидное мыло;
- нежелательна интимная близость за 36 часов до взятия материала.
Правильная подготовка важна для выдачи результата ПЦР. Ошибки этого этапа дают ложноположительный или ложноотрицательный результат.
Для достоверного ответа анализа нужно правильно сдавать анализ. Перед забором материала для ПЦР у женщин нельзя:
- мочиться 3 часа, еслианализ берут из уретры;
- нельзя применять бактерицидное мыло;
- вагинальные свечи, противовоспалительные и дезинфицирующие жидкие средства не применяют за 36 часов до взятия материала;
- нежелателен половой контакт за 36 часов до забора материала;
- нельзя спринцеваться;
- сдавать анализыво время менструального цикла.
Подготовка к сдаче анализа не представляет особых сложностей
От того, насколько правильно взят материал, зависит достоверность результата, поэтому материал для ПЦР должен брать врач. Специалисты лабораторий считают момент взятия материала самым важным этапом диагностики.
Анализ ПЦР выявляет ДНК хламидии. Для исследуемого материала у мужчин берут секрет предстательной железы, сперму или соскоб из уретры. В некоторых случаях для ПЦР у мужчин берут кровь. У женщин берут мазок или соскоб из уретры, влагалища или цервикального канала. При половом пути заражения для выявления урогенитального хламидиоза берут соскоб с больного органа, а не мазок на хламидии. Для уточнения диагностики трахомы берут соскоб с конъюнктивы глаз.
При проведении ПЦР в пробирки с материалом добавляют специальные реактивы и ставят в прибор. Метод осуществляется прибором автоматически в заданном режиме. Ответ результата ПЦР выглядит как положительный или отрицательный. Если в исследуемом материале обнаружены хламидии, выдаётся положительный ответ.
Нет ни одного метода, который бы на 100% точно выявил хламидиоз и фазу развития процесса.
ПЦР - экспериментальный метод биохимии
Поэтому, если в анализе ПЦР обнаружены хламидии, следует уточнить стадию заболевания анализом ИФА. Интерпретацию анализов проводит врач с учётом анамнеза клинической картины заболевания.
Показания для ПЦР
Анализ ПЦР назначается в таких случаях:
- острая урогенитальная инфекция, при которой появляется жжение, зуд, изменившийся запах выделений из половых органов и дискомфорт при мочеиспускании. У мужчин в конце мочеиспускания появляется кровь.
- Затянувшаяся инфекция мочеполового тракта у женщин – кольпит, эрозия шейки матки или остроконечные кондиломы.
- Патологические изменения при беременности – отягощённый акушерский анамнез.
- Выкидыши и мертворождение.
- Бесплодие.
Анализ ПЦР назначается и для проверки эффективности антибактериального лечения хламидиоза, но не раньше чем через месяц из-за возможного получения ложноположительного результата.
В заключение напомним, хламидиоз – это наиболее распространённая урогенитальная инфекция, передающаяся половым путём. Заболевание является причиной женского и мужского бесплодия. Инфекция поражает детей внутриутробно или при рождении. На современном этапе достоверный и специфичный метод диагностики болезни – анализ ПЦР. Для анализа используется мазок или чаще соскоб эпителиальных клеток, а также кровь, осадок мочи или сперма. В ряде случаев для уточнения стадии хламидиоза метод ПЦР дополняется анализом ИФА.
От точности и скорости диагностики напрямую зависит, как быстро можно будет начать лечение . Это заболевание не дает специфичных симптомов, поэтому лабораторные методы диагностики выходят на первый план для определения возбудителя.
Метод полимеразной цепной реакции - один из самых современных методов диагностирования. Врачи оценили его точность и скорость получения результатов, поэтому часто назначают этот тип анализа в ходе детального обследования и выявления хламидиоза.
Данный тип исследования используют для всех возрастных категорий, его можно назначать даже новорожденным детям, не говоря о взрослых мужчинах и женщинах.
Объектом исследования при анализе является хламидия трахоматис - патогенный микроорганизм, присутствие которого в организме вызывает развитие хламидиоза.
По международной системе классификации заболеваний МКБ-10, которую используют медики всего мира, хламидийной инфекции присвоен код А74.
Болезнь может давать различные симптомы, а может протекать абсолютно бессимптомно, но ПЦР-исследование способно выявить бактерию даже в этом случае, чем не могут похвастаться остальные инструментально-клинические методы.
Суть анализа заключается в том, чтобы точно скопировать и быстро размножить фрагменты цепочки ДНК того микроорганизма, который стал причиной заболевания. Чтобы ускорить этот процесс, в лаборатории применяют специальные ферменты, способные активизировать постройку новых генетических цепочек.
Результатом таких воспроизведений становится увеличение генетического материала в пробе, доходящее до миллиона раз, что значительно облегчает его выявление. После того, как ДНК микроорганизма обнаружено, его тщательно исследуют под микроскопом и безошибочно определяют. Определение выполняет лаборант, сравнивая полученный образец с эталонными, имеющимися в лаборатории, которые заказывают в исследовательских институтах.
Нередко ПЦР используется при поиске причин бесплодия или неспособности к вынашиванию плода или осложнениях в ходе беременности. Также человек может пожелать провести диагностику после незащищенного полового акта с партнером, в здоровье которого не уверен.
Плюсы и минусы метода ПЦР
Среди неоспоримых преимуществ анализа выделяются такие:
- высокая чувствительность методики (не менее 95%);
- возможность применения в инкубационном, латентном или хроническом периоде хламидиоза, а также при носительстве;
- перечень материала для исследования строго не определяется, поэтому при невозможности использовать, к примеру, кровь можно легко заменить ее мокротой или слизью с половых органов;
- скорость получения данных после анализа (в среднем протокол выдают на руки на следующий день, но при острой необходимости возможно получить его и в день взятия пробы);
- анализ является прямым и позволяет выявить саму бактерию хламидии трахоматис, а не косвенные показатели ее присутствия - антитела.
Немаловажным фактором является то что полимеразная цепная реакция во время обследования позволяет одновременно выявлять некоторые сопутствующие заболевания, имеющие общую симптоматику с хламидиозом. Такими инфекциями являются практически все урогенитальные инфекции, многие вирусные и бактериальные болезни ( , кандидоз, цитомегалия и пр.).
К недостаткам относятся:
- высокие требования по санитарным нормам к лаборатории паолимеразной цепной реакции, которые необходимо соблюдать, чтобы не получить ложноположительных результатов из-за загрязнения пробы;
- незначительная вероятность ложноотрицательного результата (для того, чтобы избежать этого явления необходимо тестирование сразу нескольких видов биоматериала);
- сложность интерпретации результатов, которые должен оценивать квалифицированный специалист, учитывая динамику хламидиоза и обладая достаточными знаниями в сфере иммунологии и инфекционных болезней;
- высокая стоимость исследования, что объясняется особыми требованиями к оснащению лаборатории и квалификацией персонала.
Несмотря на наличие недостатков, в настоящее время ПЦР признан самым удачным в плане диагностики хламидиоза.
Какой материал необходимо сдать для анализа
Для того, чтобы успешно провести тестирование образца при помощи полимеразной цепной реакции на хламидии, достаточно небольшого объема материала, что является еще одним преимуществом. Для диагностики подходит большинство биологических жидкостей, кровь и образцы мягких тканей.
У мужчин для определения хламидий берут:
- мазок из уретры;
- мазок из конъюнктивы;
- сперму;
- мочу;
- жидкость из предстательной железы;
- синовиальную жидкость.
Материалом, который берут для исследования у женщин, является:
- соскоб из уретры;
- эпителий из цервикального канала;
- моча;
- мазок из конъюнктивы;
- синовиальная жидкость.
Кровь берется из локтевой вены на руке, достаточно 10-15 мл. В современных лабораториях для этого используют специальные вакуумные системы, которые предотвращают попадание посторонних микробов в образец, увеличивая тем самым точность результатов.
Если необходим образец синовиальной жидкости, то делают пункцию суставного аппарата специальной толстой иглой с диаметром 0,8 мм. Введение этой иглы проходит болезненно, поэтому иногда перед введением применяют местное обезболивание.
Биоматериал могут отобрать в лаборатории, а могут делать отбор проб непосредственно в поликлинике или больнице, после чего направлять его на тестирование в ПЦР лабораторию. Некоторые частные диагностические центры за дополнительную плату берут образцы для исследования на дому у пациента.
Для оценки заражения околоплодных вод хламидиями во время беременности отбирают небольшое количество амниотической жидкости. Делают это только при острой необходимости, так как методика несет небольшую опасность для протекания беременности. Для этого производят прокол брюшной полости и под контролем УЗИ отбирают необходимое количество околоплодных вод.
Для всех беременных при постановке на учет в женскую консультацию назначают обследование на наличие хламидий в крови, для чего проводят ПЦР-тестирование, поскольку хламидиоз является тяжелой TORCH-инфекцией, способной нарушить ход беременности и осложнить развитие плода. Для такого типа обследования всегда используют кровь из вены.
Подготовка к анализу ПЦР
Правильная подготовка к обследованию на хламидии - одно из основных требований для получения корректных и точных результатов.
Для каждого типа биоматериала предусматривается специфичная подготовка. О всех требованиях, необходимых в процессе подготовки к ПЦР тестированию, пациенту должен подробно рассказать специалист, который выдает направление.
Перед сдачей мазков или мочи женщинам запрещено:
- на протяжении 3 суток пользоваться внутривагинальными свечами;
- применять вагинальные спринцевания, орошения или тампоны, пропитанные любыми настоями или отварами трав.
Сдавать мазок для ПЦР анализа на хламидиоз во время месячных нельзя.
Перед сдачей мазков или мочи как мужчинам, так и женщинам запрещается:
- ходить в туалет меньше, чем за 3 часа до отбора;
- выполнять гигиенические процедуры с применением дезинфицирующих или антибактериальных средств;
- заниматься сексом на протяжении 3-х предшествующих суток.
Для девочек возрастом до 14 лет мазок могут брать не из влагалища, а из слизистой оболочки преддверия влагалища, чтобы не повредить девственную плеву.
Перед сдачей крови для ПЦР на хламидии нужно не употреблять спиртные напитки, несколько дней не есть жирную пищу и жареные блюда, а также не курить за несколько часов до манипуляции.
Сдавая мочу, необходимо помнить, что показательнее всего - первая утренняя порция, первые и последние капли отбрасываются. Контейнер обязательно должен быть стерильным. Для исследования нужно предоставить около 50 миллилитров мочи.
Перед отбором материала любого типа для определения хламидий нельзя принимать антибиотики или уросептики. Это возможно только в том случае, если исследование проводится для определения эффективности лечения, в остальных случаях применять такие препараты на протяжении двух недель перед ПЦР-диагностикой запрещено.
Расшифровка результатов
Исследование на наличие хламидий при помощи полимеразной цепной реакции является качественным методом, то есть он показывает не количество бактерий в пробе, а их присутствие или отсутствие.
В протоколе ПЦР анализа указывается фамилия пациента, дата исследования, название бактерии (Chlamydia trachomatis) и полученный результат: положительный («обнаружено») или отрицательный («не обнаружено»). Иногда их описывают при помощи значков «+» или «-».
Если получен положительный результат, то это означает, что в организме присутствует острый процесс, или пациент является носителем заболевания.
В норме отрицательный результат означает, что в пробе не обнаружены такие бактерии, то есть, он здоров.
Если у взрослого человека обнаружена бактерия хламидия трахоматис, это означает, что половому партнеру обязательно нужно обследоваться даже в том случае, если клинических проявлений хламидиоза у него нет. Отсутствие симптомов не гарантирует отсутствие болезни, у него может быть бессимптомная форма, которая не исключает осложнений и возможности заразить других людей.
В завершение следует отметить, что ПЦР является одним из основных средств выявления хламидиоза в настоящее время, тогда как другие методы преимущественно используют в качестве дополнительных методов.
Об особенностях диагностики хламидиоза методом ПЦР на данном видео рассказывает врач-венеролог.